胞磷膽堿鈉的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定胞磷膽堿鈉（C₁₄H₂₅N₄NaO₁₁P₂·H₂O)的含量。

本方法適用于胞磷膽堿鈉。

供試品制成水溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)276nm處檢測(cè)胞磷膽堿鈉吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 磷酸鹽緩沖液

3. 磷酸四丁基銨溶液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液 甲醇= 95 5，

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：276nm

2.3 柱溫：室溫

1. 磷酸鹽緩沖液

0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液和磷酸四丁基銨溶液等量混合。

2. 磷酸四丁基銨溶液

取0.01mol/L四丁基氫氧化銨溶液用磷酸調(diào)pH值至4.5。

3. 稱取供試品

精密稱取本品適量。

4. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取5’-胞苷酸適量，加水制成每1mL含0.25mg的溶液，取上述溶液適量，與胞磷膽堿鈉對(duì)照品等量混合，搖勻，即得。

5. 供試品溶液的制備

將供試品加水溶解后，制成每1mL含0.25mg的溶液，搖勻，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)276nm處測(cè)定胞磷膽堿鈉的吸收值，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.443。