氫化可的松的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定氫化可的松的含量。

本方法適用氫化可的松。

供試品和內(nèi)標(biāo)均制成甲醇溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)240nm處檢測(cè)氫化可的松（C₂₁H₃₀O₅)和內(nèi)標(biāo)炔諾酮的吸收值，計(jì)算出其含量。

甲醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按氫化可的松峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000。氫化可的松峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：水 甲醇= 30 70

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品適量，精密稱定。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取氫化可的松對(duì)照品適量，加甲醇溶解并稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取炔諾酮適量，加稀甲醇制成每1mL中約含有0.40mg的溶液，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品加稀甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述供試品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液5mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，混合均勻，取10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)240nm處測(cè)定氫化可的松和內(nèi)標(biāo)炔諾酮的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。氫化可的松對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.402。