黃氏響聲丸－貝母素乙的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定黃氏響聲丸中貝母素乙的含量。

本方法適用于黃氏響聲丸中貝母素乙含量的測定。

供試品加乙醚－氯仿－乙醇混合溶液，超聲處理，冷浸，濾過，揮干濾液，殘渣用氯仿溶解，制成供試液，點樣、展開，以稀碘化鉍鉀溶液顯色，用薄層掃描儀進行掃描，于波長λs=515nm，λ_R=650nm測量貝母素乙（C₂₇H₄₃NO₃)吸收度積分值，計算其含量。

1. 氨水

2 .乙醚

3 .氯仿

4 .乙醇

5 .石油醚

6 .醋酸乙酯

7 .甲醇

8 .稀碘化鉍鉀試液：取堿式硝酸鉍0.85g，加冰醋酸10mL與水40mL溶解后，分取5 mL，加碘化鉀溶液（4→10)5mL，再加冰醋酸20mL，用水稀釋至100mL，即得。

1 儀器

1.1超聲提取器

1.2薄層掃描儀

1.3涂布器

應能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點樣器

一般采用微升毛細管或與之相應的點樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

2.3硅藻土

1. 對照品溶液的制備

精密稱取貝母素乙對照品適量，加氯仿制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品5g，除去包衣，研細，精密稱取粉末（過四號篩)約4g，加硅藻土適量，充分攪拌均勻，加濃氨試液1mL使?jié)駶�，密塞，放�?0分鐘，加乙醚－氯仿－乙醇（50：16：5)混合溶液50mL，超聲處理30分鐘，冷浸過夜，濾過，藥渣用少量上述混合溶液洗滌3次，合并洗液和濾液，揮干，殘渣用氯仿溶解，轉移至 2mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1. 薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預制板。

2. 點樣

精密吸取供試品溶液 10μL、對照品溶液 4μL與 5μL，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

3. 展開

將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以石油醚（60～90°C)－醋酸乙酯－甲醇－濃氨試液（10：10：2：1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，晾干。

4. 含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進行掃描，波長：λs=515nm，λ_R=650nm， 測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。

用外標法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學工業(yè)出版社，2005年版，一部p.590。