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病例組選自2005年8月-2007年12月期間就診于武漢同濟醫(yī)院，武漢協(xié)和醫(yī)院和武鋼總醫(yī)院的冠心病患者。CHD診斷依據(jù)WHO診斷標準或經(jīng)冠脈造影顯示有一支或一支以上冠脈狹窄≥50%者。對照組來自2007年夏季武鋼總醫(yī)院體檢人群。正常對照組均經(jīng)過嚴格病史詢問、體格檢查、心電圖檢查和一般生化指標檢查，檢查結(jié)果無CHD、嚴重的肝、腎疾病者入選，有周圍血管疾病或周圍血管栓塞疾病者均未入選。
1.2 DNA 的提取
基因組DNA抽提使用PUREGENE DNA提取試劑盒(德國 Gentra公司)從全血中提取DNA，并于-80 ℃冰箱長期保存。
1.3 基因型的測定
擴增HSP701基因的上游引物為5′CTTCCCAGAGCGAACCTGTG3′，下游引物為5'GCAGAACACCGTGTTTGACG3′，用25 μL PCR反應體系，反應條件為94 ℃預變性5 min后、按94 ℃變性30 s、61 ℃退火45 s、72 ℃延伸1 min，進行30個循環(huán)，末次循環(huán)后72 ℃延伸10 min;20 μL酶切體系包括10 μL PCR 產(chǎn)物和5U限制性內(nèi)切酶BsrB I，37 ℃酶切4 h。酶切及瓊脂糖凝膠電泳后可見在 351 bp的HSP701 PCR產(chǎn)物中，GG基因型攜帶者為171、116、64 bp共3個片段，GC基因型為287、171、116、64 bp共4個片段，CC基因型為287、64 bp的2個片段。
1.4 統(tǒng)計學處理
采用SPSS 13.0軟件處理，等位基因頻率采用頻率計數(shù)法計算。組間基因型和等位基因頻率及計數(shù)資料比較用χ2檢驗。以α=0.05為差異顯著性水平。
2 結(jié)果
2.1 研究對象一般人口學特征
納入本次研究的均為中國漢族人，冠心病組217例，其中男性133例，女性84 例，平均年齡(61.24±9.34)歲。對照組217例，其中男性133例，女性84例，平均年齡(62.08±8.17)歲。兩組性別、年齡構(gòu)成差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)醫(yī).學.全.在.線gydjdsj.org.cn。
2.2 遺傳平衡檢驗
將對照組的HSP701基因各基因型代入HardyWeinberg遺傳平衡定律，進行群體代表性檢驗。結(jié)果HSP701各基因型頻率與期望值基本吻合(χ2=0.318，P>0.05)，基本符合HardyWeinberg遺傳平衡定律。
2.3 HSP701各基因型在病例組和對照組的分布
HSP701基因190位點各基因型及等位基因基因頻率在兩組人群的分布差異有顯著性(P<0.05)，見表1。表1 HSP701基因各基因型在病例組
3 討論
熱休克蛋白是生物細胞受到高溫、感染、炎癥、缺血等應激刺激時產(chǎn)生的一種在進化上高度保守的蛋白質(zhì)，具有廣泛的生物學功能。HSP70是HSP家族中最保守和最主要的一類，HSP70具有多種生物學功能，包括分子伴侶功能，參與免疫反應，抗細胞凋亡功能，抗氧化功能，提高細胞的應激耐受性，促進細胞增殖，參與細胞骨架的形成和修復等，廣泛的生物學功能使其成為當今生命科學研究中的熱點[1]。
