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1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康2月齡普通級(jí)豚鼠，體重240～320 g，雌雄不拘，由南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(蘇)2001-0011。實(shí)驗(yàn)期間分籠飼養(yǎng)于安靜室內(nèi)，自然光照，室溫20～26 ℃，濕度40%～70%，飼喂全價(jià)顆粒料和新鮮蔬菜，每周換墊料1次。
1.1.2 藥品及試劑 健兒強(qiáng)身膏口服液：由南通市中醫(yī)院制劑室按制備工藝生產(chǎn)提供，每毫升相當(dāng)于生藥1 g[生產(chǎn)批文號(hào)：通制劑(2001)04—125]。藥物主要組成成分：黨參、炒白術(shù)、茯苓、炒白芍、山藥、炒谷麥芽、焦楂曲、黃芪、黃精、南北沙參、菟絲子、山芋肉、桑葚子、女貞、生熟地、川斷、陳皮、甘草、仙靈脾、天麥冬、蒸百部、紅棗、浮小麥、法半夏、黃芩、補(bǔ)骨脂。陽性對(duì)照藥：地塞米松磷酸鈉注射液(江蘇漣水制藥有限公司，批號(hào)：0411171)。致敏劑：卵蛋白(OVA)，上海伯奧生物科技有限公司，批號(hào)0050114。
1.1.3 主要儀器 PARIBOY超聲霧化機(jī)，德國百瑞;密閉透明容器(320 mm×260 mm×200 mm)，自制;奧林巴斯CX41顯微鏡，日本;形態(tài)圖像分析系統(tǒng)，南京捷達(dá)公司;外科手術(shù)器械1套。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 動(dòng)物分組及劑量 取符合實(shí)驗(yàn)要求的豚鼠48只，隨機(jī)分成6組：空白對(duì)照組(正常組)、哮喘模型組、地塞米松治療組：地塞米松1 mg/kg體重、健兒強(qiáng)身膏低劑量組：生藥4 g/kg體重、健兒強(qiáng)身膏中劑量組：生藥8 g/kg體重、健兒強(qiáng)身膏高劑量組：生藥16 g/kg體重，每組8只。
1.2.2 造模及給藥方法 按照國際上通用的方法，以經(jīng)典的卵蛋白致敏和攻擊復(fù)制動(dòng)物模型[4]。除空白對(duì)照組外，其余各組動(dòng)物每只分別腹腔注射10%卵蛋白生理鹽水溶液1 ml致敏，于第15、16、17天，將豚鼠逐個(gè)放入自制密閉容器中，超聲霧化機(jī)衡壓噴入1%卵蛋白生理鹽水溶液30 S任其自由吸入，觀察豚鼠呼吸節(jié)律、深度、膈肌收縮及有無抽搐跌倒等呼吸道痙攣梗阻等癥狀。其強(qiáng)度可分為四級(jí)：Ⅰ：呼吸加劇;Ⅱ：呼吸困難，點(diǎn)頭呼吸;Ⅲ：腹肌痙攣，抽搐;Ⅳ：翻滾跌倒甚至死亡。出現(xiàn)上述癥狀即為造模成功。此時(shí)立即取出動(dòng)物，置通風(fēng)處，換氣。同時(shí)記錄引喘潛伏期(T)，并進(jìn)行比較。潛伏期：從吸入1%卵蛋白生理鹽水溶液到腹肌痙攣、抽搐的時(shí)間。從第18天開始給藥。模型組每天給予生理鹽水10 ml/kg灌胃，中藥低、中、高各組按規(guī)定劑量灌胃，陽性對(duì)照組按1 mg/kg體重腹腔注射給藥，連續(xù)給藥18天。并與給藥后第6、12、18天分別誘喘1次，同時(shí)記錄哮喘發(fā)作潛伏期�？瞻捉M以生理鹽水替代卵蛋白同步實(shí)驗(yàn)。
1.2.3 標(biāo)本采集 最后1次給藥后24 h內(nèi)，每只豚鼠稱重后用3%戊巴比妥鈉1 ml/kg注射，麻醉后腹主動(dòng)脈放血處死。迅速選取右肺中葉于4%多聚甲醛(含1‰DEPC)中固定48 h后，常規(guī)石蠟包埋，切片，蘇木精-伊紅(HE)染色，光鏡觀察醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站www.gydjdsj.org.cn。
迅速取火柴頭大小的右下肺組織標(biāo)本，用3%戊二醛固定，1%四氯化鋨后固定，Epon-812樹脂包埋，做超薄切片，醋酸鈾、枸櫞酸鉛染色，透射電鏡觀察并照相。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均用x±s表示，SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析， P<0.05、0.01示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié) 果
2.1 健兒強(qiáng)身膏對(duì)哮喘豚鼠引喘潛伏期的影響 見表1。治療后，哮喘模型組引喘潛伏期與治療前比較未見明顯差異。
2.2 肺組織病理變化觀察 正常組：細(xì)支氣管黏膜上皮排列整齊，細(xì)支氣管壁內(nèi)未見炎性細(xì)胞浸潤，平滑肌周圍偶見Eos(圖1A1-2);哮喘組：細(xì)支氣管黏膜上皮排列紊亂、增生明顯，支氣管黏膜及黏膜下層組織有大量的Eos、中性粒細(xì)胞浸潤，支氣管壁增厚，管腔狹窄，腔內(nèi)有大量的上皮細(xì)胞脫落，組織黏膜充血水腫明顯等典型的氣道炎癥表現(xiàn)(圖1B1-2);地塞米松治療組：組織黏膜仍有比較明顯的充血水腫等，但Eos浸潤較哮喘組豚鼠明顯減輕，可見到淋巴細(xì)胞等，腔內(nèi)有少量的上皮細(xì)胞和炎性細(xì)胞。(圖1C1-2);健兒強(qiáng)身膏治療組：與地塞米松治療組相似，Eos浸潤較哮喘組豚鼠明顯減輕，可見淋巴細(xì)胞等，組織仍有充血水腫，腔內(nèi)有少量的上皮細(xì)胞和炎性細(xì)胞。其中高、中劑量組支氣管管腔擴(kuò)大，肺泡間隔明顯變薄，肺泡腔變大，肺泡區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤明顯減少(圖1E1-2，1F1-2)，中藥低劑量組(圖1D1-2)有所減輕。
