醫(yī)學(xué)微生物學(xué):第一節(jié)　正粘病毒

粘病毒（Orthomyxovirus)是指對(duì)人或某些動(dòng)物紅細(xì)胞表面的粘蛋白有親和性的病毒，正、副粘病毒的分別以其核酸是否分節(jié)段為標(biāo)準(zhǔn)，分節(jié)段者為正粘病毒，不分節(jié)段者為副粘病毒；其實(shí)正粘gydjdsj.org.cn/yaoshi/病毒gydjdsj.org.cn/zhicheng/只有流行性感冒病毒(Influenza virus)一個(gè)種。

流行性感冒病毒

流行性感冒病毒簡(jiǎn)稱流感病毒，是引起流感的病原體，流感是一種上呼吸道急性傳染病，它傳染性強(qiáng)、傳播快、潛伏期短、發(fā)病率高。已引起數(shù)次世界性大流行，僅1918～1919年的世界大流行，死亡人數(shù)就達(dá)2000萬(wàn)，對(duì)人類的生命健康危害極大。

一、生物學(xué)性狀

（一)形態(tài)與結(jié)構(gòu)

流感病毒具有多形態(tài)，有的呈絲狀、有的呈桿狀，但一般為球形，病毒的直徑為80～120nm，內(nèi)有一直徑約為70nm 的電子致密核心，其實(shí)就是病毒的核衣殼。絲狀體長(zhǎng)短不一，長(zhǎng)度有時(shí)可達(dá)4000nm，直徑與球形病毒相同。流感病毒的結(jié)構(gòu)主要包括內(nèi)部的核心（即核衣殼)和外面的包膜（即病毒囊膜)兩部分。

1．甲、乙型流感病毒為8個(gè)節(jié)段，丙型為7個(gè)節(jié)段，每一個(gè)節(jié)段就是一個(gè)基因，決定流感病毒的遺傳特性，其基因組分節(jié)段的特點(diǎn)使本病毒具有高頻率基因重配，容易發(fā)生變異。流感病毒RNA外包繞的蛋白質(zhì)中，三種分子量較大的蛋白P1、P2、P3均為RNA多聚酶，與RNA的轉(zhuǎn)錄有關(guān)，其他均為核蛋白。核蛋白的抗原穩(wěn)定，很少發(fā)生變異，具有型特異性。根據(jù)核蛋白抗原性的不同，可把感染人的流感病毒分為甲、乙、丙三型。

2．病毒囊膜流感病毒囊膜由內(nèi)向外，可分為內(nèi)膜蛋白、類脂和糖蛋白三層。內(nèi)膜蛋白（M蛋白)是包圍在病毒核心外的一層膜六結(jié)構(gòu)，介于核蛋白與脂質(zhì)雙層膜之間，與組成脂質(zhì)雙層膜的類脂緊密結(jié)合，在維持病毒形狀與完整性上起重要作用。類脂層是脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)，它來(lái)自宿主細(xì)胞膜或核膜，其中鑲嵌的兩種糖蛋白向外突出脂質(zhì)雙層形成刺突，構(gòu)成了流感病毒囊膜的第三層一糖蛋白層。糖蛋白層由兩種糖蛋白刺突組成，一種是神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase NA)，一種是血凝素 (Hemagglutinin HA)。

神經(jīng)氨酸酶是由4條相同的糖基化多肽所組成的蘑菇狀四聚體，具有酶活性，可水解宿主細(xì)胞表面糖蛋白末端的N-乙酰神經(jīng)氨酸，有利于成熟病毒的釋放（抗神經(jīng)氨酸酶抗體能抑制病毒從細(xì)胞釋放，但沒有中和作用)；神經(jīng)氨酸酶的抗原結(jié)構(gòu)較易發(fā)生變異，它是流感病毒亞型的劃分依據(jù)之一。

血凝素：是由3條糖基化多肽分子以非共價(jià)形式聚合而成的三聚體，其C末端有一疏水區(qū)插入病毒囊膜的雙層脂質(zhì)膜中，是HA與病毒囊膜的結(jié)合部位。N末端有一疏水區(qū)，具有膜融合活性，對(duì)病毒侵入宿主細(xì)胞是必須的。HA能與多種動(dòng)物（如雞、豚鼠)和人的紅細(xì)胞表面的糖蛋白受體相結(jié)合，引起紅細(xì)胞凝集，我們把這種現(xiàn)象叫血凝。若在病毒與細(xì)胞混合前先加抗血凝素抗體，使該抗體首先與病毒血凝素結(jié)合，當(dāng)再加入紅細(xì)胞時(shí)，由于病毒血凝集上結(jié)合的抗體的阻斷作用，血凝素就不能再與紅細(xì)胞上的受體結(jié)合，紅細(xì)胞就不出現(xiàn)凝集，這種現(xiàn)象我們稱為血凝抑制。血凝和血凝抑制，是病毒學(xué)研究常用的檢測(cè)指標(biāo)。

血凝集是流感病毒的主要中和抗原，其抗原性最易發(fā)生變異。它是流感病毒亞型劃分的另一依據(jù)。

（二)分型、變異與流行

按核蛋白的可溶性補(bǔ)體結(jié)合抗原的不同，流感病毒被分為甲（A)、乙（B)和丙（C)三型；各型流感病毒又根據(jù)其表面血凝素及神經(jīng)氨酸酶抗原性的不同再分為若干亞型。從世界上過(guò)去流感流行的資料分析，認(rèn)為乙型和丙型流感病毒抗原性比較穩(wěn)定；甲型的表面抗原HA、HA最易變異，二者可同時(shí)變異，也可分別發(fā)生。自1934年分離出甲型流感病毒以來(lái)，已發(fā)生多次世界性的大流行（見表24-2)以及大流行間期的小流行。其流行規(guī)模的大小，主要取決于病毒表面抗原變異幅度大��；幅度小，屬于量變稱抗原漂移（Antigen drift)，是核酸序列的點(diǎn)突變，致使HA或HA抗原決定簇發(fā)生某些改變，并在免疫人群中被選擇出來(lái)，可引起中小流行。若變異幅度大，即新毒株的HA和/或NA完全與前次流行株失去聯(lián)系，形成新的亞型，系質(zhì)變稱抗原轉(zhuǎn)(Antigenic shift)，是由核酸序列不斷的突變積累或外來(lái)基因片斷重組所致。這種抗原性的轉(zhuǎn)變使人群原有的特異性免疫力失效，因此可以引起大規(guī)模甚至世界性的流感流行。

表24-2 甲型流感病毒在不同年代的表現(xiàn)抗原變化

(三)培養(yǎng)特性

流感病毒在雞胚中生長(zhǎng)良好，一般初次分離應(yīng)先接種羊膜腔中傳代適應(yīng)后方接種尿囊腔。病毒在雞胚中并不引起明顯病變。用血凝試驗(yàn)可判斷羊水或與尿囊液中有無(wú)病毒生長(zhǎng)。人流感病毒能感染多種動(dòng)物，但只有雪貂的表現(xiàn)類似人類流感。另外，甲、乙型流感在原代人胚腎、猴腎等組織細(xì)胞中也能生長(zhǎng)。

（四)抵抗力

流感病毒抵抗力較弱，不耐熱，56℃30分鐘即被滅活，室溫下感染性很快消失；對(duì)干燥、日光、紫外線及乙醚、甲醛等敏感；酸性條件下更易滅活，但在-70℃或冷凍干燥后活性可長(zhǎng)期保存。

二、致病性與免疫性

流感病毒經(jīng)過(guò)飛沫傳播，侵入呼吸道，通過(guò)其HA吸附于呼吸道粘膜上皮細(xì)胞膜上的HA受體上，然后浸入這些細(xì)胞進(jìn)行增殖。經(jīng)1～2天的潛伏期，感染者即可出現(xiàn)流感癥狀。病毒在呼吸道粘膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，造成這些細(xì)胞變性，壞死脫落，粘膜充血水腫，腺體分泌增加；出現(xiàn)噴嚏、鼻塞、咳嗽等癥狀。病毒在上皮細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，很少入血，但可釋放內(nèi)毒素樣物質(zhì)入血，引起全身中毒癥狀：發(fā)熱、頭痛、全身酸痛、疲乏無(wú)力、白細(xì)胞數(shù)下降等。流感病毒感染一般數(shù)日內(nèi)自愈，但幼兒或年老體弱病人易繼發(fā)細(xì)菌感染，如合并肺炎等，病死率高。

病后對(duì)同型病毒有免疫力，可維持1～2年，主要為分泌型lga 和血清中和抗體lgM、lgG共同的作用；這些抗體有兩類：一是抗病毒血凝素抗體，能阻止病毒侵入易感細(xì)胞，在抗感染中起重要作用，另一類是抗神經(jīng)氨酸酶抗體，能少細(xì)胞排毒和病毒擴(kuò)散。此外CTL可殺傷流感病毒感染細(xì)胞，在促進(jìn)受染機(jī)體的康復(fù)方面也起重要作用。

三、病毒學(xué)診斷

（一)病毒分離與鑒定采取發(fā)病初期（發(fā)病3天)病人鼻咽洗液或含漱液，加青、鏈霉素殺菌后，接種于雞胚羊膜腔內(nèi)及尿囊腔中，35℃孵育2～4日，取羊水、尿囊液做血凝試驗(yàn)，檢查有無(wú)病毒增殖。若試驗(yàn)為陰性，需在雞胚中盲目傳代三次后再試驗(yàn)。若血凝試驗(yàn)為陽(yáng)性，可用已知流感病毒各型特異性抗體與新分離病毒進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)，鑒定型別。

（二)血清學(xué)試驗(yàn)取病人急性期（發(fā)病3日內(nèi))和恢復(fù)期（發(fā)病2～4周)雙份血清，同樣與已知各亞型流感病毒進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)或其他試驗(yàn)�；謴�(fù)期血清的抗體效價(jià)是急性期的4倍或4倍以上，具有協(xié)助診斷意義。

免疫熒光技術(shù)直接檢測(cè)鼻分泌物中病毒抗原，能夠達(dá)到快速診斷的目的。

四、防治原則

流感病毒傳染性強(qiáng)，播散迅速，在易感人群中易形成大流行，故做好預(yù)防是必要的。

流行期間應(yīng)盡量避免人群聚集，公共場(chǎng)所如劇院、宿舍應(yīng)常通風(fēng)換氣，必要時(shí)空氣消毒：常用乳酸，100m3空間用2～4ml乳酸溶于10倍水中加熱熏蒸，無(wú)乳酸時(shí)用食醋亦可。

流感疫苗有滅活疫苗和減毒活疫苗，但因流感病毒抗原易變，及時(shí)掌握變異動(dòng)態(tài)及選育毒株使制成的疫苗抗原性與流行株相同或近似極為重要。

治療尚無(wú)特效方法，金剛烷胺對(duì)甲型流感病毒復(fù)制有抑制作用，在預(yù)防和治療上有一定效果，但此藥能引起中樞神經(jīng)癥狀和耐藥毒株出現(xiàn)未被廣泛使用。目前主要是對(duì)癥治療及預(yù)防繼發(fā)細(xì)菌感染。

中藥：金銀花、板蘭根、大青葉等在減輕癥狀縮短病程方面有一定效果。