雞的病毒性關節(jié)炎
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雞病毒性關節(jié)炎(Viral Arthritis)是一種由呼腸孤病毒引起的雞的重要傳染病。病毒主要侵害關節(jié)滑膜、腱鞘和心肌，引起足部關節(jié)腫脹，腱鞘發(fā)炎，繼而使腓腸腱斷裂。病雞關節(jié)腫脹、發(fā)炎，行動不便，跛行或不愿走動，采食困難，生長停滯。雞病毒性關節(jié)炎概述 雞群的飼料利用率下降，淘汰率增高，在經(jīng)濟上造成一定的損失。1957年Olson對該病作了首次報道。其后美國、英國、意大利、荷蘭、日本、匈牙利等國相繼報道了病毒性關節(jié)炎的病例。從80年代中期開始，我國先后在四川、河北、北京、黑龍江、上海、廣東、吉林、云南、貴州、河南、山東、湖北等地發(fā)現(xiàn)本病，并從有些病例中分離到呼腸孤病毒。雞病毒性關節(jié)炎是我國養(yǎng)雞業(yè)不可忽視的傳染病之一。病原體 病毒性關節(jié)炎的病原為禽呼腸孤病毒(Avain reovirus)。該病毒與其他動物的呼腸孤病毒在形態(tài)方面基本相同，病毒粒子無囊膜，呈20面體對稱排列，直徑約為75nm，在氯化銫中的浮密度為1.36～1.37g/ml。其基因組由10個節(jié)段的雙鏈RNA構成。 禽呼腸孤病毒對熱有一定的抵抗能力，能耐受60℃達8～10h。對乙醚不敏感。對 H202、pH3、2%來蘇爾、3%福爾馬林等均有抵抗力。用70%
乙醇和0.5%有機碘可以滅活病毒�！ 『裟c孤病毒可通過卵黃囊和絨毛尿囊膜(CAM)接種而在雞胚中生長繁殖。通過卵黃囊接種，一般在接種后3～5天雞胚死亡；通過CAM接種，通常在接種后7～8天雞胚死亡。除雞胚之外，Reov還可在原代雞胚成纖維細胞、肝、睪丸細胞，以及vero、BHK-21等傳代細胞中生長。 由于缺乏對多種動物紅細胞的凝集特性而使禽Reov區(qū)別于其他動物的呼腸孤病毒。 Reov各毒株之間具有共同的沉淀抗原，但中和抗原具有明顯的異源性。由于采用的試驗方法不同，對毒株的分型結果也不盡相同。Rosenberger等認為呼腸孤病毒經(jīng)常以抗原亞型，而不是以獨特的血清型存在。我國從1985年首次報道雞病毒性關節(jié)炎以來，已經(jīng)在全國各地分離了多個Reov毒株，但不同毒株之間的相互關系還沒有進行過系統(tǒng)研究�！ ‰u呼腸孤病毒除引起雞關節(jié)炎以外，還能引起一些其他的疾病和病變，如
吸收不良綜合征、傳染性腺胃炎、
心包炎、心包積水、
心肌炎、腸炎、肝炎、法氏囊及胸腺萎縮、骨骼異常,以及某些呼吸道癥狀。
流行病學 雞呼腸孤病毒廣泛存在于自然界，可從許多種鳥類體內(nèi)分離到。但是雞和火雞是目前已知唯一可被Reov引起關節(jié)炎的動物。病毒在雞中的傳播有兩種方式：水平傳播和垂直傳播。雖然有資料表明，Reov可通過種蛋垂直傳播，但水平傳播是該病的主要傳染途徑。病毒感染雞之后，首先在呼吸道和消化道復制后進入血液，24～48h后出現(xiàn)病
毒血癥，隨后即向體內(nèi)各組織器官擴散，但以關節(jié)腱鞘及消化道的含毒較高。排毒途徑主要是經(jīng)過消化道。試驗表明，由口腔感染SPF成年雞，4天后可從呼吸道、消化道、生殖道和股關節(jié)分離到病毒，14～15天后含毒量明顯降低。感染后的Reov在股關節(jié)內(nèi)存在3周，14～16周后，仍能從感染雞的泄殖腔發(fā)現(xiàn)病毒。因此，帶毒雞是重要的傳染源�！ ‰u病毒性關節(jié)炎的感染率和發(fā)病率因雞的年齡不同而有差異。雞年齡越大，敏感性越低，10周齡之后明顯降低。一般認為，雛雞的易感性可能與雛雞的免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全有關�！ ∽匀桓腥景l(fā)病多見于4～7周齡雞，也有更大雞齡發(fā)生關節(jié)炎的報道。發(fā)病率可高達100%，而死亡率通常低于6%。在山東部分地區(qū)進行的一次血清學調(diào)查結果顯示，在11萬羽肉仔雞中，呼腸孤病毒感染的陽性率達75.2%，5萬羽蛋雞中陽性率為23.5%。臨床癥狀 本病大多數(shù)野外病例均呈隱性感染或
慢性感染，要通過血清學檢測和病毒分離才能確定。在急性感染的情況下，雞表現(xiàn)跛行，部分雞生長受阻；慢性感染期的跛行更加明顯，少數(shù)病雞跗關節(jié)不能運動。病雞食欲和活力減退，不愿走動，喜坐在關節(jié)上，驅趕時或勉強移動，但步態(tài)不穩(wěn)，繼而出現(xiàn)跛行或單腳跳躍�！ 〔‰u因得不到足夠的水分和飼料而日漸消瘦，貧血，發(fā)育遲滯，少數(shù)逐漸衰竭而死。檢查病雞可見單側或雙側躡部、跗關節(jié)腫脹。在日齡較大的肉雞中可見腓腸腱斷裂導致頑固性跛行�！ 》N雞群或蛋雞群受感染后，產(chǎn)蛋量可下降10%～15%。也有報道種雞群感染后種蛋受精率下降，這可能是病雞因運動功能障礙而影響正常的交配所致。病理變化 1．剖檢變化 患雞跗關節(jié)上下周圍腫脹，切開皮膚可見到關節(jié)上部腓腸腱
水腫，滑膜內(nèi)經(jīng)常有充血或點狀出血，關節(jié)腔內(nèi)含有淡黃色或血樣滲出物，少數(shù)病例的滲出物為膿性，與傳染性滑膜炎病變相似，這可能與某些細菌的繼發(fā)感染有關。其他關節(jié)腔呈淡紅色，關節(jié)液增加。根據(jù)病程的長短，有時可見周圍組織與骨膜脫離。大雛或成雞易發(fā)生腓腸腱斷裂。換羽時發(fā)生關節(jié)炎，可在患雞皮膚外見到皮下組織呈紫紅色。慢性病例的關節(jié)腔內(nèi)滲出物較少，腱鞘硬化和粘連，在跗關節(jié)遠端關節(jié)軟骨上出現(xiàn)凹陷的點狀潰爛，然后變大、融合，延伸到下方的骨質(zhì)，關節(jié)表面纖維軟骨膜過度增生。有的在切面可見到肌和腱交接部發(fā)生的不全斷裂和周圍組織粘連，關節(jié)腔有膿樣、干
酪樣滲出物。有時還可見到心外膜炎，肝、脾和心肌上有細小的壞死灶�！ �2．組織學病變 一般來說，實驗室感染和自然感染的病變是一致的。在急性期出現(xiàn)水腫、凝固性壞死，異嗜細胞集聚血管周圍浸潤，網(wǎng)狀細胞增生，最后引起腱鞘壁層明顯增厚，滑膜腔充滿異嗜細胞和脫落的滑膜細胞，隨著破骨細胞增生而形成骨膜炎。在慢性期，滑膜形成絨毛樣突起，并有淋巴樣結節(jié)，炎癥出現(xiàn)一段時間之后，大量纖維組織增生，明顯見到網(wǎng)狀細胞、淋巴細胞、巨噬細胞和漿細胞的浸潤或增生。趾關節(jié)和跗關節(jié)區(qū)也出現(xiàn)相同的一般炎癥反應。心肌纖維之間的異噬細胞浸潤是此病較為恒定的變化。有些病例伴有單核細胞或網(wǎng)狀細胞的增生。肝臟的病變有時也較為明顯，主要表現(xiàn)為大小不一的出血灶和肝細胞壞死灶，在壞死灶的周圍有異染性細胞和淋巴細胞的浸潤。紅細胞、血細胞容積和白細胞總數(shù)一般在正常范圍內(nèi)，異嗜細胞百分比稍有增加，但淋巴細胞百分比下降。診斷鑒別 1.根據(jù)癥狀和病變進行初步診斷 雖然此病的類癥鑒別頗為困難，但根據(jù)癥狀和病變的特點，在臨診中可對該病做出初步診斷。以下幾點具有診斷價值： (1)病雞跛行，跗關節(jié)腫脹�！ �(2)心肌纖維之間有異噬細胞浸潤�！ �(3)患病毒性關節(jié)炎的雞群中，常見有部分雞呈現(xiàn)發(fā)育不良綜合征現(xiàn)象，病雞蒼白，骨鎢化不全，羽毛生長異常，生長遲緩或生長停止�！ �2．病原學診斷 (1)病毒的分離與鑒定：病原的分離鑒定是最確切的診斷方法�？蓮哪[脹的腱鞘、跗關節(jié)的關節(jié)液、氣管和支氣管、腸內(nèi)容物及脾臟等取病料進行病毒分離。從病變部分分離病毒時，要注意取病料的時間，感染后2周之內(nèi)較易分離到病毒。病料在接種前的處理可參考其他病毒分離時的操作程序。從野外病料分離病毒，最好采用5～7日齡的雞胚卵黃囊內(nèi)接種，雞胚應來自SPF或沒有Reo感染的種雞群。接種后3～5天，雞胚死亡，胚體出血，內(nèi)臟器官充血、出血、胚體呈淡紫色。如種蛋帶有Reo母源抗體，或者病料含毒量低，則雞胚死亡的時間會推遲，也可能有部分雞胚會孵出。在接種后較長時間才死亡的雞胚，其胚體發(fā)育不良，肝、脾、心腫大并有細小壞死灶，胚體呈暗紫色。如將含病毒材料接種于CAM上，接種后的胚胎死亡規(guī)律和胚體變化與卵黃囊接種的結果基本相同，特征變化是絨毛尿囊膜增厚，有白色或淡黃色的痘斑樣病變，CAM細胞內(nèi)可見到胞漿內(nèi)包含體�！ 》蛛x到病毒之后，可通過病毒理化特性測定、電鏡觀察、病毒核酸電泳、血清學檢驗皮動物敏感性試驗等進行鑒定�！ �(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)：應用ELISA雙抗體夾心法可以檢測雞Reo病毒。該法具有較高的特異性和敏感性，在人工感染后2～27天，關節(jié)滑膜、腱鞘和脾臟中病毒檢出翠為100%�！ �(3)熒光抗體法(FA) FA是檢測雞Reo病毒的一個比較有效、快速、特異的方法。將病雞的腱鞘、肝、脾等進行冰凍切片、丙酮固定后，用抗Reo病毒的熒光抗體染色，熒光顯微鏡下可見到亮綠色的團塊狀抗原，據(jù)此可對本病進行診斷。肖成蕊等采用 FA檢測8例人工感染雞及18例自然感染雞，脾臟和肝臟檢出率為100%，認為脾和肝是 FA檢測Reo病毒的首選器官�！ �3．血清學診斷 血清學檢驗的方法很多，除了常用的瓊脂擴散試驗(AGP)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)外，還有間接熒光抗體方法(IFA)及中和試驗(VN)等�！ �(1)瓊脂擴散試驗(AGP)： AGP是最常用的雞病毒性關節(jié)炎的診斷方法。病毒感染2～3周后，該方法能檢查出呼腸孤病毒的群特異性抗體。王錫望等采用S1133株接種雞胚尿囊膜，制備雞呼腸孤病毒AGP抗原。用該抗原對腳掌部接種的
雞血清進行AGP檢測，接種后7天的陽性率為93%，14～90天為100%，105天為94%，120天為64%，150天為25%。該法雖然敏感性稍低，不適宜檢測低滴度抗體，但操作簡便，易于推廣，實用性強，既可用于雞群流行病學調(diào)查，又可用于雞病毒性關節(jié)炎的診斷�！ �(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)： Slaght等首次建立了ELISA方法檢測禽Reo病毒抗體，使用S1133毒株作抗原，發(fā)現(xiàn)它與Reo25和WVV2939株的抗體發(fā)生反應，同源抗體滴度最高。國內(nèi)陳士友等、單松華等先后建立了檢測禽Reo抗體的ELISA方法。該法與AGP相比，具有敏感性高、快速、適合自動化等優(yōu)點。目前，ELISA系統(tǒng)已商品化。該系統(tǒng)適合于群體Reo抗體水平的分析。防制措施 對該病目前尚無有效的治療方法，所以預防是控制本病的唯一方法。由于Reo病毒本身的特點，加上現(xiàn)代養(yǎng)雞的高密度，要防止雞群接觸病毒是困難的，因此，預防接種是目前條件下防止雞病毒性關節(jié)炎的最有效方法。為了防止本病流行，在國外研制出了許多種弱毒苗和滅能的禽呼腸孤病毒疫苗，并制定了相應的免疫程序。目前國外應用的弱毒疫苗有通過雞胚72代致弱的S-1133弱毒株，可飲水免疫30周齡或10~17周齡種雞，其后代能抵抗經(jīng)口攻毒；完全減毒疫苗P100苗，此苗是用S-1133毒株通過雞胚傳235代后，再通過雞胚成纖維細胞培養(yǎng)100代致弱而成。P-100苗可用于1日齡雛雞，皮下接種，經(jīng)14日后免疫雛雞能抵抗同源病毒的攻擊。還有UMI-203弱毒苗，蓋淼對8~18周齡的種雞無致病力，但對雛雞的毒力很強。該苗的優(yōu)點是交叉免疫比S-1133株強，因其抗原性較寬。 由于雛雞對致病性Reo病毒最易感，而至少要到2周齡開始才具有對Reo病毒的抵抗力，因此，對雛雞提供免疫保護應是防疫的重點。接種弱的活疫苗可以有效地產(chǎn)生主動免疫，一般采用皮下接種途徑。但用S-1133弱毒苗與馬立克氏病疫苗同時免疫時，S1133會干擾馬立克氏病疫苗的免疫效果，故兩種疫苗接種時間應相隔5天以上。無母源抗體的后備雞，可在6-8日齡用活苗首免，8周齡時再用活苗加強免疫，在開產(chǎn)前2～3周注射滅活苗，一般可使雛雞在3周內(nèi)不受感染。這已被證明是一種有效的控制雞病毒性關節(jié)炎的方法。將活疫苗與滅活疫苗結合免疫種雞群，可以達到很好的免疫效果。但在使用活疫苗時要注意疫苗毒株對不同年齡的雛雞的毒性是不同的�！ ∫话愕念A防方法是加強衛(wèi)生管理及雞舍的定期消毒。采用“全進全出”的飼養(yǎng)方式，對雞舍徹底清洗和消毒，可以防止由上批感染雞留下的病毒的感染。由于患病雞長時間不斷向外排毒，是重要的感染源，因此，對患病雞要堅決淘汰。
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