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一種用于評(píng)價(jià)HCVNS3/4A絲氨酸蛋白酶抑制劑的融合蛋白及其應(yīng)用

公開(公告)號(hào) CN101153060A  
公開(公告)日 2008.04.02  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200710175298.X  
申請(qǐng)日期 2007.09.28  
專利名稱 一種用于評(píng)價(jià)HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶抑制劑的融合蛋白及其應(yīng)用  
主分類號(hào) C07K19/00(2006.01)I  
分類號(hào) C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I;C12Q1/37(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 詹林盛;賈帥爭(zhēng);付秋霞  
地址 100850北京市海淀區(qū)太平路27號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 魯 兵  
國(guó)省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 用于評(píng)價(jià)HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶活性的融合蛋白,由細(xì)胞內(nèi)定位因子-NS3/4A絲氨酸蛋白酶作用底物-報(bào)告基因SEAP組成的融合基因插入真核表達(dá)載體形成指示載體后表達(dá)產(chǎn)生。  
摘要 本發(fā)明公開了用于評(píng)價(jià)HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶活性的融合蛋白及其應(yīng)用,具體的融合蛋白EGFP-NS4A/4B-SEAP是融合基因EGFP-NS4A/4B-SEAP插入真核表達(dá)載體PCIneo形成指示載體EGFP(Δ4AB)SEAP后表達(dá)產(chǎn)生。融合蛋白EGFP-NS4A/4B-SEAP依靠EGFP在細(xì)胞內(nèi)定位,在細(xì)胞內(nèi)有NS3/4A絲氨酸蛋白酶共表達(dá)的情況下,在NS4A/4B處發(fā)生切割作用,使得SEAP游離出來(lái)并通過(guò)其自身的信號(hào)肽分泌到細(xì)胞外,通過(guò)測(cè)定胞外SEAP活性便可反映出HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶的活性。利用本發(fā)明可以簡(jiǎn)單、快速、靈敏而且可以定量指示絲氨酸蛋白酶活性,具有較高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值,在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。  
國(guó)際公布  
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