| 公開(公告)號 | CN101070339A |
| 公開(公告)日 | 2007.11.14 |
| 申請(專利)號 | CN200710108076.6 |
| 申請日期 | 2007.05.24 |
| 專利名稱 | 桑寄生抗肝癌BEL-7402蛋白的制備方法 |
| 主分類號 | C07K1/20(2006.01)I |
| 分類號 | C07K1/20(2006.01)I;C07K2/00(2006.01)I;A61K36/185(2006.01)N;A61P35/00(2006.01)N;A61P1/16(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2006.5.26 CN 200610026979.5 |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 劉山莉;張林甦;張 健 |
| 地址 | 200444上海市寶山區(qū)上大路99號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海上大專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 顧勇華 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種桑寄生抗肝癌BEL-7402蛋白制備方法，其特征在于具有以下工藝過程和步驟： a.桑寄生粗品蛋白的制備：將干燥的中草藥桑寄生粉碎成200目粉末，用0.1～0.3mol/L氯化鈉溶液在4℃下浸提12～24小時，浸提液用布氏漏斗過濾，得濾液；在濾液中加入硫酸銨固體，調(diào)至飽和度為60～80％，隨后在4℃下靜置過夜；然后用離心分離機(jī)在6000rpm轉(zhuǎn)速下低溫離心分離20分鐘，得沉淀物粗品蛋白CLP； b.粗品蛋白的分子篩層析純化：將上述所得的粗品蛋白CLP用去離子水溶解，并用Tris-HCI緩沖液透析，隨后用孔徑為0.45μ濾膜超濾；濾液上SephadexG100分子篩層析柱，用0.05mol/L Tris-HCI緩沖液洗脫，流速為1毫升/分鐘，每5分鐘收集1管，分部收集；檢測蛋白質(zhì)含量后，合并收集管得二部分有效組分；然后冷凍干燥，得二部分分子篩凝膠層析產(chǎn)品，即為純化后的桑生蛋白。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種桑寄生植物中草藥中抗肝癌BEL-7402蛋白的提取或制備方法，屬生有分離純化工藝方法技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明方法的特征在于具有以下工藝步驟：(1)將中草藥桑寄生粉碎，用氯化鈉溶液浸提12～24小時，抽濾混合物得濾液；(2)濾液中加入硫酸銨固體調(diào)至飽和度70％，離心分離得沉淀物粗品蛋白；(3)將粗品蛋白以水溶解、超濾，濾液上層析柱得蛋白活性組分，然后冷凍干燥，得純化后的桑寄生蛋白。由MTT法檢測肝癌細(xì)胞BEL-7402生長抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，桑寄生蛋白對肝癌細(xì)胞BEL-7402生長抑制作用較為顯著。 |
| 國際公布 |
