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番紅花球莖中具有抗腫瘤效果的有效活性成份的提取方法

公開(公告)號 CN101028389A  
公開(公告)日 2007.09.05  
申請(專利)號 CN200710067535.0  
申請日期 2007.03.07  
專利名稱 紅花球莖中具有抗腫瘤效果的有效活性成份的提取方法  
主分類號 A61K36/88(2006.01)I  
分類號 A61K36/88(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61K125/00(2006.01)N  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 王飛娟;朱 誠;潘薛波;趙 凱;高建青;陳文莉  
地址 310000浙江省杭州市余杭塘路388號浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 胡紅娟  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項 一種番紅花球莖中具有抗腫瘤效果的有效活性成份的提取方法,包括如下步驟: (1)番紅花球莖經(jīng)清洗,用提取液研磨提取,所述的提取液是濃度為50mmol/L、PH值為8.0三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液,其中還含有濃度為1mmol/L的苯甲基磺酰氟、濃度為5mmol/L的二硫蘇糖醇,番紅花球莖的質(zhì)量與提取液的體積比為1∶2; (2)將提取液離心分離得到上清液,取上清液加入NaCl固體,使NaCl的摩爾濃度為0.4mol/L;并二次離心去除雜質(zhì),得到去除雜質(zhì)的上清液; (3)將去除雜質(zhì)的上清液通過層析柱進行分離,上樣10ml,層析后用90-120ml洗脫液A洗脫30min,洗脫出A組份,洗脫速度為2.0ml/min;再用100ml洗脫液B洗脫30min,洗脫出B組份,洗脫速度為2.0ml/min;洗脫液A是濃度為20mmol/L、PH值為8.0三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液,其中還含有濃度為0.4mol/L的NaCl,洗脫液B是濃度為20mmol/L、PH值為8.0三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液,其中還含有濃度為0.8mol/L的NaCl; (4)將步驟(3)得到B組份過濾脫鹽、冷凍干燥后得白色粉末,用LC-304C-4高效液相色譜柱進行液相色譜分離,檢測到保留時間為10.3-14.2min的物質(zhì)即為具有抗腫瘤效果的有效活性物質(zhì)有效活性成份,液相色譜分離條件為:流速1.0ml/min,采用波長214nm的UV檢測器,流動相為乙腈和水的混合溶液。  
摘要 本發(fā)明公開了一種番紅花球莖中具有抗腫瘤效果的有效活性成份的提取方法,包括(1)番紅花球莖經(jīng)清洗,用提取液研磨提取;(2)將提取液離心分離得到上清液,取上清液加入NaCl固體并二次離心去除雜質(zhì),得到去除雜質(zhì)的上清液;(3)將去除雜質(zhì)的上清液通過層析柱進行分離,洗脫出B組份;(4)將步驟(3)得到B組份過濾脫鹽、冷凍干燥后得白色粉末,用液相色譜分離,保留時間為10.3-14.2min的物質(zhì)即為具有抗腫瘤效果的有效活性成份。本發(fā)明方法分離好,可適用于大量生產(chǎn)。  
國際公布  
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