有效的多重檢測丙型肝炎病毒(HCV)和人免疫缺損病毒(HIV)的寡核苷酸引物及其使用方法
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公開(公告)號
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CN1213150C
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公開(公告)日
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2005.08.03
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申請(專利)號
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CN00104630.6
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申請日期
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2000.02.02
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專利名稱
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有效的多重檢測丙型肝炎病毒(HCV)和人免疫缺損病毒(HIV)的寡核苷酸引物及其使用方法
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68;G01N33/576
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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1999.2.3 US 60/118498
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申請(專利權)人
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奧索臨床診斷有限公司
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發(fā)明(設計)人
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K·M·戈曼;D·R·帕特森;;J·M·林南;K·宋
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地址
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美國紐約州
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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中國專利代理(香港)有限公司
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代理人
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吳大建
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國省代碼
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美國;US
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主權項
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一種共檢測生物樣本中的丙型肝炎病毒(HCV)RNA和人免疫缺損病毒(HIV)RNA的方法，該方法包括：(A)用來源于上述樣本的RNA作為模板、并用至少一種引發(fā)從HCVRNA的DNA逆轉(zhuǎn)錄的逆轉(zhuǎn)錄引物和至少一種引發(fā)從HIVRNA的DNA逆轉(zhuǎn)錄的逆轉(zhuǎn)錄引物進行逆轉(zhuǎn)錄反應，以產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，該產(chǎn)物包括(a)HCV特異性逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，(b)HIV特異性逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，或(c)包括(a)和(b)的組合；(B)用一對或多對對HCV的5‘非編碼區(qū)特異的寡核苷酸引物和一對或多對對HIV特異的寡核苷酸引物對上述逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行擴增，以產(chǎn)生擴增產(chǎn)物，該擴增產(chǎn)物包括(a)HCV特異性擴增產(chǎn)物，(b)HIV特異性擴增產(chǎn)物，或(c)(a)和(b)的組合；其中上述每一對對HCV特異的寡核苷酸引物包括：(i)正向引物5’-GGGAGAGCCATAGTGGTCTGCGGAA-3’(C131F25)<序列號1>，和(ii)反向引物5’-CGGGGCACTCGCAAGCACCCTATCA-3’(C294R25)<序列號2>；其中每一對對HIV-1特異的寡核苷酸引物包括如下序列的正向引物：5’-CTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGA-3’(JBLTR4)<序列號3>，和選自下列的對HIV-1特異的反向引物：(1)5’-GGGTCTGAGGGATCTCTAGTTACCAGAGT-3’(JBLTR6)<序列號4>，和(2)5’-TGTTCGGGCGCCACTGCTAGAGA-3’(JBLTR8)<序列號5>，其中每一對對HIV-2特異的寡核苷酸引物包括：序列為5’-GGGAGGTTCTCTCCAGCACTAGCA-3’(2LTRe)<序列號6>的正向引物，和對HIV-2特異、序列為5’-GCGACTAGGAGAGATGGGAACACACA-3’(2LTR-R1)<序列號7>的反向引物；和(C)檢測上述擴增產(chǎn)物；其中對HCV-特異性擴增產(chǎn)物的檢出表明上述樣本中存在HCVRNA，對HIV-特異性擴增產(chǎn)物的檢出表明上述樣本中存在HIVRNA，對HCV-特異性擴增產(chǎn)物和HIV-特異性擴增產(chǎn)物的檢出表明上述樣本中存在HCVRNA和HIVRNA。
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摘要
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本發(fā)明公開了用于同時檢測人生物樣本中的丙型肝炎病毒和人免疫缺損病毒的方法和試劑盒。
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國際公布
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