有效的多重檢測丙型肝炎病毒(HCV)和人免疫缺損病毒(HIV)的寡核苷酸引物及其使用方法
公開(公告)號(hào)
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CN1213150C
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公開(公告)日
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2005.08.03
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN00104630.6
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申請(qǐng)日期
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2000.02.02
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專利名稱
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有效的多重檢測丙型肝炎病毒(HCV)和人免疫缺損病毒(HIV)的寡核苷酸引物及其使用方法
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主分類號(hào)
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C12Q1/68
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分類號(hào)
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C12Q1/68;G01N33/576
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1999.2.3 US 60/118498
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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奧索臨床診斷有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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K·M·戈曼;D·R·帕特森;;J·M·林南;K·宋
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地址
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美國紐約州
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國專利代理(香港)有限公司
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代理人
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吳大建
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國省代碼
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美國;US
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主權(quán)項(xiàng)
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一種共檢測生物樣本中的丙型肝炎病毒(HCV)RNA和人免疫缺損病毒(HIV)RNA的方法,該方法包括:(A)用來源于上述樣本的RNA作為模板、并用至少一種引發(fā)從HCVRNA的DNA逆轉(zhuǎn)錄的逆轉(zhuǎn)錄引物和至少一種引發(fā)從HIVRNA的DNA逆轉(zhuǎn)錄的逆轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),以產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,該產(chǎn)物包括(a)HCV特異性逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,(b)HIV特異性逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,或(c)包括(a)和(b)的組合;(B)用一對(duì)或多對(duì)對(duì)HCV的5‘非編碼區(qū)特異的寡核苷酸引物和一對(duì)或多對(duì)對(duì)HIV特異的寡核苷酸引物對(duì)上述逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行擴(kuò)增,以產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物,該擴(kuò)增產(chǎn)物包括(a)HCV特異性擴(kuò)增產(chǎn)物,(b)HIV特異性擴(kuò)增產(chǎn)物,或(c)(a)和(b)的組合;其中上述每一對(duì)對(duì)HCV特異的寡核苷酸引物包括:(i)正向引物5’-GGGAGAGCCATAGTGGTCTGCGGAA-3’(C131F25)<序列號(hào)1>,和(ii)反向引物5’-CGGGGCACTCGCAAGCACCCTATCA-3’(C294R25)<序列號(hào)2>;其中每一對(duì)對(duì)HIV-1特異的寡核苷酸引物包括如下序列的正向引物:5’-CTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGA-3’(JBLTR4)<序列號(hào)3>,和選自下列的對(duì)HIV-1特異的反向引物:(1)5’-GGGTCTGAGGGATCTCTAGTTACCAGAGT-3’(JBLTR6)<序列號(hào)4>,和(2)5’-TGTTCGGGCGCCACTGCTAGAGA-3’(JBLTR8)<序列號(hào)5>,其中每一對(duì)對(duì)HIV-2特異的寡核苷酸引物包括:序列為5’-GGGAGGTTCTCTCCAGCACTAGCA-3’(2LTRe)<序列號(hào)6>的正向引物,和對(duì)HIV-2特異、序列為5’-GCGACTAGGAGAGATGGGAACACACA-3’(2LTR-R1)<序列號(hào)7>的反向引物;和(C)檢測上述擴(kuò)增產(chǎn)物;其中對(duì)HCV-特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的檢出表明上述樣本中存在HCVRNA,對(duì)HIV-特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的檢出表明上述樣本中存在HIVRNA,對(duì)HCV-特異性擴(kuò)增產(chǎn)物和HIV-特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的檢出表明上述樣本中存在HCVRNA和HIVRNA。
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摘要
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本發(fā)明公開了用于同時(shí)檢測人生物樣本中的丙型肝炎病毒和人免疫缺損病毒的方法和試劑盒。
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國際公布
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評(píng)論加載中...