| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1332024C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2007.08.15 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410020708.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.06.09 |
| 專利名稱 | 一種海綿細(xì)胞的微載體三維培養(yǎng)方法 |
| 主分類號(hào) | C12N5/06(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N5/06(2006.01)I;C12N11/00(2006.01)I;C12M3/00(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 張 衛(wèi);趙權(quán)宇;虞星炬;金美芳 |
| 地址 | 116023遼寧省大連市中山路457號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 |
| 代理人 | 許宗富;周秀梅 |
| 國(guó)省代碼 | 遼寧;21 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種海綿細(xì)胞的微載體三維培養(yǎng)方法，其特征在于：1)在改進(jìn)人工海水中接種微載體和海綿細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)；改進(jìn)人工海水的水溶液中溶質(zhì)成分為：Na+300～500mM，SO42-5.0～10.0mM，HCO3-0.1～0.5mM，K+5.0～15.0mM，Tris HCl 10.0～30.0mM，Cl-300～500mM，Mg2+20～60mM，Ca2+5.0～20mM，SiO32-5～150μM，F(xiàn)e3+30～120μM，Zn2+0.5～4μM，C6H5O73-30～120μM，pH 7.6～8.2，PHA的重量濃度為5～2.5％；2)在海綿細(xì)胞培養(yǎng)5～8天后，向上述改進(jìn)人工海水中添加有機(jī)碳源、有機(jī)氮源和維生素C，使它們的濃度分別為5～20μM，形成新的培養(yǎng)液體系；3)在步驟2)之后，每隔2～3天更換培養(yǎng)液體積的50～80％，用改進(jìn)的人工海水替換并添加有機(jī)碳源和氮源使其最終濃度達(dá)到20～50μM，添加維生素C使其最終濃度達(dá)到10～20μM，在此條件下海綿細(xì)胞能進(jìn)行正常生長(zhǎng)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及海洋無(wú)脊椎動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，具體地說(shuō)是一種海綿細(xì)胞的微載體三維培養(yǎng)方法；1)在改進(jìn)人工海水中接種微載體和海綿細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)；改進(jìn)人工海水的水溶液中包括：Na+，SO42-，HCO3-，K+，Tris HCl，Cl-，Mg2+，Ca2+，SiO32-，F(xiàn)e3+，Zn2+，C6H5O73-，pH 7.6～8.2，PHA；2)在海綿細(xì)胞培養(yǎng)5～8天后，向上述改進(jìn)人工海水中添加有機(jī)碳源、有機(jī)氮源和維生素C，形成新的培養(yǎng)液體系；3)在步驟2)之后，每隔2～3天更換培養(yǎng)液，并添加有機(jī)碳源和氮源，維生素C，在此條件下海綿細(xì)胞能進(jìn)行正常生長(zhǎng)。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)為：可大規(guī)模生產(chǎn)藥源，可選材料更廣泛，應(yīng)用前景好。 |
| 國(guó)際公布 |
