公開(公告)號
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CN100338212C
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公開(公告)日
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2007.09.19
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申請(專利)號
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CN03110980.2
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申請日期
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2003.01.29
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專利名稱
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人組織激肽釋放酶的微囊化細胞及其微囊化方法和應(yīng)用
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主分類號
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C12N5/00(2006.01)I
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分類號
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C12N5/00(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N9/50(2006.01)I;C12N15/57(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;C12N11/02(2006.01)I;A61K38/48(2006.01)I;A61K35/12(2006.01)I;A61K9/48(2006.01)I;A61P9/12(2006.01)I;A61P13/12(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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張玉奎;于曉明;張維冰;楊 青;徐茂蘭
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地址
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116023遼寧省大連市中山路457號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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沈陽科苑專利商標代理有限公司
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代理人
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許宗富;周秀梅
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國省代碼
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遼寧;21
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主權(quán)項
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一種人組織激肽釋放酶的微囊化細胞的微囊化方法,其特征在于:1)構(gòu)建組織激肽釋放酶腺病毒表達載體;2)重組腺病毒Ad.CMV-cHK轉(zhuǎn)染細胞;具體為:將0.1~1×107pfu的病毒加入到1~2×106個/mL細胞培養(yǎng)液中,混勻,病毒即吸附到細胞表面,進入細胞內(nèi);3)細胞的微囊化操作;具體為:挑選生長良好并高表達人組織激肽釋放酶的小鼠成纖維細胞進行微囊化處理,取0.5~2×107細胞與1毫升12~16g/L海藻酸鈉,充分混勻,以壓縮氮氣將此混合物通過針頭噴灑入100mM氯化鈣溶液中,形成珠狀的海藻酸鈉鈣凝膠顆粒,收集顆粒,用分子量24kDaSigma0.4~0.6g/L多聚賴氨酸處理5~8分鐘,再用3~5g/L海藻酸鈉處理2~4分鐘,生理鹽水洗滌,最后用pH7.410mM檸檬酸鈉液化微膠囊核心海藻酸鈣,培養(yǎng)于DMEM+10%胎牛血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)。
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摘要
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本發(fā)明涉及人組織激肽釋放酶,具體地說是人組織激肽釋放酶的微囊化細胞及其微囊化方法和應(yīng)用;在基因修飾的表達人組織激肽釋放酶的細胞上包覆著具有剛性和雙向流通性的包膜材料;應(yīng)用于治療高血壓和/或腎臟疾病中;本發(fā)明具有如下優(yōu)點:1.適于臨床需要;2.適于實際應(yīng)用;3.應(yīng)用效果明顯;4.方法確實可行。
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國際公布
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