| 公開(公告)號 | CN100342026C |
| 公開(公告)日 | 2007.10.10 |
| 申請(專利)號 | CN200410027176.2 |
| 申請日期 | 2004.05.13 |
| 專利名稱 | 重組人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體制備方法 |
| 主分類號 | C12P21/00(2006.01)I |
| 分類號 | C12P21/00(2006.01)I;A61K35/74(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 深圳新鵬生物工程有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 李政海;胡家華;田 賓;李繼東 |
| 地址 | 518057廣東省深圳市南山區(qū)高新技術園北區(qū)郎山二路 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 深圳市博銳專利事務所 |
| 代理人 | 張 明 |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權項 | 一種重組人可溶性腫瘤壞死因子相關調(diào)亡誘導配體制備方法，包括以下步驟：a、選用工程菌rsTRAIL96-281-pET15b-BL21(DE3)CGMCCNo.0659做菌株進行發(fā)酵培養(yǎng)，其特征在于，還包括步驟：b、對發(fā)酵培養(yǎng)所得菌體進行洗滌和超聲破碎；c、對破碎所得菌體物質(zhì)進行鹽析處理；d、對鹽析處理所得菌體物質(zhì)進行層析純化處理，包括以下步驟：①.在鹽析處理所得菌體物質(zhì)中加入Tris·Cl溶液，進行離心處理，保留上清；②.上疏水柱，收集穿柱峰；③.對收集物進行分子篩凝膠層析柱脫鹽處理；④.上第一陰離子交換層析柱，收集20％鹽濃度目的峰；⑤.對收集物進行分子篩凝膠層析柱脫鹽處理；⑥.上第二陰離子交換層析柱，收集8％鹽濃度目的峰；e、對層析純化處理所得菌體物質(zhì)進行緩沖液體系更換處理，包括以下步驟：①.對層析純化處理所得菌體物質(zhì)進行分子篩凝膠層析處理；②.把層析純化處理所得菌體物質(zhì)中的緩沖液更換為Na2HPO4-NaH2PO4溶液。 |
| 摘要 | 一種重組人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)制備方法，包括步驟a.選用工程菌rsTRAIL96-281-pET15b-BL21(DE3)CGMCC No.0659做菌株進行發(fā)酵培養(yǎng)，還包括步驟：b.對發(fā)酵培養(yǎng)所得菌體進行洗滌和超聲破碎；c.對破碎所得菌體物質(zhì)進行鹽析處理；d.對鹽析處理所得菌體物質(zhì)進行層析純化處理；e.對層析純化處理所得菌體物質(zhì)進行緩沖液體系更換處理。同現(xiàn)有技術相比較，采用本制備方法，可以實現(xiàn)TRAIL蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)，為TRAIL蛋白的實際應用提供可能。 |
| 國際公布 |
