公開(公告)號
|
CN1757745A
|
公開(公告)日
|
2006.04.12
|
申請(專利)號
|
CN200410017881.4
|
申請日期
|
2004.04.23
|
專利名稱
|
一種利用甲醇酵母系統(tǒng)高效表達tPA等外源蛋白的方法及其表達產(chǎn)物的純化制備技術
|
主分類號
|
C12P21/00(2006.01)I
|
分類號
|
C12P21/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權
|
|
申請(專利權)人
|
黃秀東;唐德江
|
發(fā)明(設計)人
|
黃秀東;李樹剛;于廷和
|
地址
|
201206上海市浦東新區(qū)碧云路333弄中天碧云苑18號603室
|
頒證日
|
|
國際申請
|
|
進入國家日期
|
|
專利代理機構
|
重慶市恒信專利代理有限公司
|
代理人
|
劉小紅
|
國省代碼
|
上海;31
|
主權項
|
一種通過基因工程菌株制備一大類目的蛋白或多肽的方法,通過此方法表達出的蛋白質(zhì)具有CP-LS-CS-IP樣的特征性結構, 其中CP-代表伴侶蛋白(CP-,ChaperonProtein) LS-指連接肽的序列(LS-,LinkerSquence) CS-是蛋白酶法或化學法切割時的識別肽段序列(CS-,CleavageSquence) IP-表示目的蛋白或多肽(IP,InterestofProtein/Peptide)。
|
摘要
|
本發(fā)明涉及一種甲醇酵母通用表達載體PICZa-DoI的構建,其關鍵是可以利用該表達系統(tǒng)以融合蛋白的方式生產(chǎn)一類常規(guī)方法難以高水平表達的外源重組蛋白。采用此表達系統(tǒng)已經(jīng)成功的表達了突變型人組織纖溶酶原激活物(rPA)、人膜聯(lián)蛋白V-尿激酶活性片段融合蛋白(Anx-scUK)和突變型人神經(jīng)生長因子(mut-hNGF)等。該表達系統(tǒng)的產(chǎn)生的融合蛋白可以通過螯合層析(Chelating Sepharose FF)介質(zhì)從發(fā)酵液中直接捕獲,經(jīng)過脫鹽、酶切或化學切割開融合蛋白,再用常規(guī)的層析介質(zhì)就可以純化制備出純度合乎要求的目的蛋白作為醫(yī)藥用途。
|
國際公布
|
|