公開(公告)號
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CN1978649A
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公開(公告)日
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2007.06.13
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申請(專利)號
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CN200510122246.7
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申請日期
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2005.12.08
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專利名稱
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肝臟F蛋白原核表達(dá)產(chǎn)物及其制備方法和該表達(dá)產(chǎn)物在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用
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主分類號
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C12N15/13(2006.01)I
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分類號
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C12N15/13(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K16/28(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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天津市第三中心醫(yī)院
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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劉樹業(yè)
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地址
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300170天津市河?xùn)|區(qū)津塘路83號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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天津市宗欣專利商標(biāo)代理有限公司
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代理人
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董光仁
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國省代碼
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天津;12
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主權(quán)項(xiàng)
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一種人肝臟F蛋白原核表達(dá)產(chǎn)物,其特征在于該表達(dá)產(chǎn)物能夠特異地靈敏準(zhǔn)確的反映肝細(xì)胞損傷程度,人類肝臟F抗原cDNA序列如圖7所示。
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摘要
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本發(fā)明公開了肝臟F蛋白原核表達(dá)產(chǎn)物及其制備方法和該表達(dá)產(chǎn)物在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用,屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明在PCR中采用鼠上游引物序列;5′P-CGG CAT ATG TAC TGG GAC TGG GAC AAA GGA CCA AAGCCT-3′鼠下游引物序列:5′P-TCC AGA CCT CAC ACC GTT-3′;人上游引物序列:5’-GTACTGGGACAAAGGACCAAAGCC-3’,人下游引物序列:5’-GATCTGGGAAGGCATCTTTACTCG-3’。其蛋白誘導(dǎo)表達(dá)條件是在含有氨卞青霉素和氯霉素的LB培養(yǎng)基中,培養(yǎng)含質(zhì)粒pET15b-F的表達(dá)菌BL21DE3pLysS至OD600在0.4-0.6之間,加入IPTG至終濃度為1mmol/L。本發(fā)明制備的人和大鼠肝臟F蛋白的原核表達(dá)產(chǎn)物,其特異性、靈敏性、可靠性均優(yōu)于現(xiàn)在的肝功能指標(biāo),用于判斷人類肝臟細(xì)胞損傷的程度。
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國際公布
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