方法名稱： |
金銀花及葉—黃酮類物質(zhì)的含量測(cè)定—HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于金銀花及葉中黃酮類物質(zhì)含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品粉碎后加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在350 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 高效液相色譜儀Agilent 1100 （Agilent公司) 色譜條件 色譜柱：Zorbax 80A，Extend—C18（250 mm ×4. 6 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇∶0.02%磷酸（50∶50)；流速：1. 0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：350 nm ；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 μL |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 準(zhǔn)確稱取槲皮素對(duì)照品0.0300 g，用甲醇溶解并定容于50 mL容量瓶，配制成0.60 mg/mL的溶液。取該溶液1.00 mL，用甲醇稀釋并定容至10 mL，即得濃度為0.06 mg/mL的槲皮素對(duì)照品溶液，記為溶液A。以相同的方法制備濃度為0.057 mg/mL的木犀草素對(duì)照品溶液，記為溶液A。以相同的方法制備濃度為0.057 mg/mL的木犀草素對(duì)照品溶液，記為溶液B。取1 mL溶液A和1 mL溶液B，混合均勻成溶液C，即得。 供試品溶液制備 分別稱取5 g經(jīng)過(guò)干燥粉碎的金銀花和金銀花葉各一份，用100 mL甲醇在40 ℃超聲提取30 min，過(guò)濾，減壓濃縮，濃縮液用石油醚除雜，然后用甲醇定容至25 mL容量瓶，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取槲皮素、木犀草素混合對(duì)照液以及金銀花供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算黃酮類物質(zhì)含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
王麗婷，楊敏麗. 高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定金銀花及葉中的黃酮類物質(zhì). 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2007，18（8)：1850～1851 |
