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板藍(lán)根藥材--尿苷、腺苷和鳥苷含量測定--HPLC法

  
方法名稱:
  板藍(lán)根藥材--尿苷、腺苷和鳥苷含量測定--HPLC法
應(yīng)用范圍:
  測定板藍(lán)根藥材中尿苷、腺苷和鳥苷含量
方法原理:
 藥材加水煎煮,煎煮液加95%乙醇靜置,經(jīng)液相色譜儀分離,在254nm 處測定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算尿苷、腺苷和鳥苷含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  Agilent1100系列高效液相色譜儀(在線脫氣機(jī),自動(dòng)進(jìn)樣器,二極管陣檢測器,柱溫箱);

色譜條件  色譜柱:ZORBAX SB-C18 分析柱(4.6mm ×250mm,5μm);流動(dòng)相:10mmol/l磷酸二氫鈉(1%磷酸調(diào)PH2.9)-甲醇(3:97);流速:0.8mL/min;檢測波長:254nm;柱溫:25℃;進(jìn)樣量:5 μL。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備: 分別取對照品尿苷,腺苷和鳥苷各約10mg,精密稱定,置同一10mL量瓶中,以甲醇-(50:50)超聲溶解,定容,搖勻,即得對照品儲(chǔ)備液。精密吸取對照品儲(chǔ)備液0.5mL,分別置10 mL量瓶中,加甲醇-水(50:50)定容,搖勻,即得。

供試品溶液的制備  取藥材粉末(過16目篩)約10g,精密稱定,加水300mL煎煮2次,時(shí)間分別為2h,1h,濾過,合并濾液,濃縮至10mL,加95%乙醇使醇濃度達(dá)65%,靜置24h,濾過,回收乙醇,濃縮液轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中,加水定容,搖勻,即為提取液。精密量取提取液1mL置5mL量瓶中,加水定容,搖勻,即得。
操作步驟:
  分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各5μL,注入色譜儀,測定,計(jì)算即得。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:www.gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  肖珊珊,郁,郭懷忠等.RP-HPLC法測定板藍(lán)根藥材中核苷類成分的含量.藥物分析雜志.2006,26(1):48-50
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