含苦參制劑—苦參及苦參湯—黃腐醇、苦參啶—HPLC

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方法名稱(chēng)：	含苦參制劑—苦參及苦參湯—黃腐醇、苦參啶—HPLC
應(yīng)用范圍：	本方法適用于苦參及苦參湯中黃腐醇、苦參啶含量的測(cè)定
方法原理：	本品藥材加甲醇超聲提取、處方加稀乙醇回流提取，經(jīng)液相色譜分離，在365 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：	儀器 Waters 515高效液相色譜儀，2487紫外檢測(cè)器，Millennium³²軟件系統(tǒng)，25 μL可調(diào)進(jìn)樣器色譜條件色譜柱：Phenomenex LunaC₁₈色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇-0.38 %磷酸水溶液（75∶25)；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：365 nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20 μL
試樣制備：	對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取黃腐醇和苦參啶對(duì)照品3.16 mg和5.10 mg，分別置100 mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取上述黃腐醇對(duì)照品溶液1 mL置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備 1)按苦參湯處方單味藥比例，稱(chēng)取苦參、黃芩、生地黃一定量，混勻，用稀乙醇回流提取。乙醇提取液減壓回收溶劑，殘留物加水分散，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，樹(shù)脂柱水洗去雜后，用稀乙醇洗脫。乙醇洗脫液回收溶劑，殘留物減壓干燥，得苦參湯有效部位。精密稱(chēng)取苦參湯有效部位約30 mg，置10 mL錐形瓶中，精密加甲醇2 mL，超聲溶解，用0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)后備用。2)苦參藥材溶液取苦參藥材1 g，粉碎（40目)，混勻。精密稱(chēng)取約0.2 g，置25 mL錐形瓶中，精密加入甲醇10 mL，稱(chēng)重。超聲提取40 min，再稱(chēng)重，以甲醇補(bǔ)至原重。濾過(guò)，棄去初濾液，精密移取續(xù)濾液5 mL，回收溶劑至干，殘留物用甲醇溶解轉(zhuǎn)至2 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，備用。
操作步驟：	分別精密吸取黃腐醇和苦參啶對(duì)照液以及苦參及苦參湯供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算黃腐醇和苦參啶含量。
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備注：
參考文獻(xiàn)：	劉斌，石任兵，陳碩等.HPLC法測(cè)定苦參及苦參湯中黃腐醇和苦參啶的含量.藥物分析雜志. 2006.26（5)：564~567