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紅豆杉幼苗—紫杉醇的含量測定方法—HPLC-DAD

  
方法名稱:
  紅豆杉幼苗—紫杉醇的含量測定—HPLC-DAD
應(yīng)用范圍:
  用于人工栽培南方紅豆杉幼苗中紫杉醇的含量測定
方法原理:
 本品粉末用超聲提取、離心、過柱等一系列處理后,經(jīng)液相色譜儀分離,在230nm處測定,按外標(biāo)法計算含量。
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備  美國Waters Allaince 2695型高效液相色譜儀;Waters 2996型二極管陣列檢測器。

色譜條件  色譜柱:Waters Symmetry C18 ( 150mm×3.90mm);C18小柱;流動相:甲醇-乙腈-水 (22:36∶42) ;流量:1.0ml/min;檢測波長:230nm;進樣量:10μL。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備   精密稱取紫杉醇對照品適量,以乙腈溶解并稀釋成10.2mg/ml的溶液備用。

供試品溶液的制備  精密稱取本品粉末3g于100ml錐形瓶中,加95%乙醇25ml浸泡24h,超聲處理2h,離心(3000rad/s,3min)過濾,殘渣續(xù)以95%乙醇15ml浸泡超聲2次,每次30min,離心,取上清液,合并濾液于100ml燒杯之哦那個30℃以下風(fēng)干,殘渣用50%甲醇5ml溶解,離心,取上清液過0.45μm濾膜,濾液過C18小柱,用10ml水洗脫,棄去洗脫液,再用6ml50%甲醇溶液洗脫,棄去洗脫液,最后用2ml80%甲醇溶液洗脫,收集洗脫液,為備用液。
操作步驟:
  精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL,注入液相色譜儀,依上述色譜條件測定,按外標(biāo)法計算含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:www.gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  鄭廣樂,葛彬彬,黃天偉等.HPLC法分析紅豆杉中紫杉醇的含量.福建分析測試.2004,13(3-4):2011~2013
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