三妙丸－掌葉防己堿含量的測定－高效液相色譜法

本方法采用HPLC法測定三妙丸中小檗堿的含量。

本方法適用于二妙丸、三妙丸、四妙丸等成藥。

1. 甲醇（分析純)

2. 鹽酸掌葉防己堿對照品（中國藥科大學(xué))

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀－Waters510泵（Waters公司)

Nova－PakC₁₈柱（4μm，3.9mm×15mm)

1.2 Waters U6K進樣器

1.3 Shimadzu Libror AEL－40SM精密（十萬分之一)天平

2色譜條件

2.1流動相：乙腈－水＝1：1（1000mL含磷酸二氫鉀3.4g及十二烷基硫酸鈉1.7g)

2.2檢測波長：345nm

2.3柱溫：室溫

2.4 流量：0.9mL/min

1 供試品的制備

取成藥適量，精密稱重，置10mL具塞離心管內(nèi)，加5mL甲醇超聲提取15min，離心（3000r/min)5min，傾取上清液，過濾。重復(fù)操作3次，合并濾液，濾紙及殘渣用甲醇清洗，過濾，并入上清液，定容至25mL，用微孔濾膜過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液，待用。

2 對照品溶液的配制

精密稱取鹽酸掌葉防己堿對照品10.45mg，用甲醇定容至100mL，作為儲備液。精密量取上述儲備液1mL，甲醇定容至25mL，作為對照品溶液待用。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1.標準曲線的繪制

精密吸取對照品溶液1、2、5、6、10、18、30、40μL進樣，按前述色譜條件測定峰面積，以進樣量X（μg)為橫坐標、峰面積Y為縱坐標繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液5μL注入高效液相色譜儀，按前述色譜條件測定峰面積，用標準曲線法計算樣品中掌葉防己堿含量。

潘楊,王天山，馬國祥等. HPLC法測定成藥二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黃丸中小檗堿、掌葉防己堿和藥根堿的含量.中草藥，1997，（3)：142-144.