方法名稱： |
六味地黃丸—沒(méi)食子酸的測(cè)定—毛細(xì)管區(qū)帶電泳法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳法測(cè)定六味地黃丸中沒(méi)食子酸的含量。 本方法適用于中成藥制劑六味地黃丸。 |
方法原理： |
供試品加乙醇加熱回流提取，提取液過(guò)濾，濾渣重復(fù)提取2 次，合并提取液，減壓濃縮制成供試液，進(jìn)行電泳，于波長(zhǎng)271nm處測(cè)定吸收度，按沒(méi)食子酸的吸收系數(shù)計(jì)算其含量。 |
試劑： |
1. 硼砂 2. 乙醇 |
儀器設(shè)備： |
1. 毛細(xì)管電泳儀 2. 毛細(xì)管 沒(méi)食子酸的理論塔片數(shù)n = 167 388。 3. 電泳條件的選擇 背景電解質(zhì)為20 mmol/ L 硼砂，檢測(cè)波長(zhǎng)271 nm，重力進(jìn)樣(10 cm ×5 s)，工作電壓20 kV，電泳溫度20 ℃，每次運(yùn)行前依次用0.1 mol/ L NaOH 溶液、去離子水、電泳緩沖溶液沖洗3 min。 |
試樣制備： |
1. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取沒(méi)食子酸對(duì)照品19.5 mg于25 ml 量瓶中，用95 %乙醇溶解并稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液；稱取肉桂酸對(duì)照品9.6 mg，用95 %乙醇溶解并稀釋至25 ml，作為內(nèi)標(biāo)溶液。 2. 供試品溶液的制備 將六味地黃丸粉碎后，稱取粉末5 g ，加95 %乙醇50 ml，浸泡12 h，100 ℃加熱回流提取2 h ，過(guò)濾，濾渣重復(fù)提取2次，合并提取液，減壓濃縮至10 ml，取該溶液2 ml，加入內(nèi)標(biāo)溶液1 ml，95 %乙醇稀釋至5 ml，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一，“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液0.1 、0.2 、0.4 、0.6 、0.8 、1.0 、2.0 ml 于5 ml 量瓶中,各加入肉桂酸內(nèi)標(biāo)液1 ml，95 %乙醇定容至刻度，以沒(méi)食子酸對(duì)照品峰面積與內(nèi)標(biāo)的比值對(duì)其質(zhì)量濃度作圖，得標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 |
參考文獻(xiàn)： |
趙新峰，王偉，孫毓慶。毛細(xì)管區(qū)帶電泳法測(cè)定山茱萸及六味地黃丸中沒(méi)食子酸含量，沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，V120(11)：32～34 |
