方法名稱： |
甘草浸膏粉—甘草酸的測定—毛細管區(qū)帶電泳法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用毛細管區(qū)帶電泳法測定甘草浸膏粉里甘草酸的含量。 本方法適用于中藥制劑甘草浸膏粉。 |
方法原理： |
用毛細管區(qū)帶電泳法,紫外檢測波長228nm ,電壓14kV ,以50mmol/L硼砂溶液為背景電解質(zhì),氫氯噻嗪為內(nèi)標,對甘草浸膏粉中的甘草酸進行定量分析。 |
試劑： |
1. 硼砂 2. 甘草酸單銨鹽 3. 氫氯噻嗪 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1毛細管電泳儀 1.2 毛細管柱：;石英毛細管65cm×75μm I.D. ,有效長50cm 1.3 紫外檢測器 2 毛細管電泳條件 2.1 緩沖液：50mmol/L 硼砂溶液 2.2電壓：14kV 2.3 檢測波長：228nm 2.4重力進樣10s (高度7cm) |
試樣制備： |
1.對照品溶液的制備 精密稱取甘草酸單銨鹽4. 2mg(相當(dāng)于甘草酸13. 9mg) ,置25ml量瓶中，用50mmol/L硼砂溶液定容至刻度，超聲20min作對照品溶液。 2.氫氯噻嗪溶液的制備 精密稱取氫氯噻嗪0.2537g ，置250ml 量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,即得。 3. 標準溶液的制備 精密取對照品溶液適量,置10ml量瓶中,加入氫氯噻嗪溶液1. 0ml ,用50mmol/L硼砂溶液(含體積分數(shù)10 %甲醇) 定容至刻度，搖勻，配成濃度為0. 1390 、0. 2780、0. 5560、1. 1190、2.2380 g/L，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。 4.供試品溶液的制備 精密稱取甘草浸膏粉約0. 113g ,置50ml 量瓶中, 另精密加入氫氯噻嗪溶液5. 0ml , 用50mmol/L硼砂溶液(含體積分數(shù)10 %甲醇) 定容至刻度，,超聲30min，濾過即得。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標準曲線的繪制 取上述標準溶液在毛細管電泳儀上進樣10s，記錄電泳圖10μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定甘草酸的吸收度，以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測定 取上述供試品溶液在毛細管電泳儀上進樣10s，用紫外檢測器測定甘草酸的吸收度，計算出其含量。 |
參考文獻： |
孫國祥,周雋思,孫毓慶. 解放軍藥學(xué)學(xué)報，2003，19（1)：10-12 |
