雌二醇—雌二醇的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定雌二醇（C₁₈H₂₄O₂)的含量。

本方法適用于雌二醇的含量測定。

取本品適量，加甲醇溶解并稀釋制成溶液，量取該溶液加內(nèi)標后流動相稀釋，注入液相色譜儀，在205nm波長處檢測，記錄色譜圖。另取對照品適量，同法測定，按內(nèi)標法以峰面積計算，即得。

1. 甲醇

2. 乙腈

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：乙腈＋水=55 45

2.2 檢測波長：205nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

精密稱取雌二醇對照品適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.50mg的溶液，搖勻，為對照品溶液。

2. 內(nèi)標溶液的配制

精密稱取對羥基苯甲酸乙酯適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.75mg的溶液，搖勻，為內(nèi)標溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.50mg的溶液，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

精密量取供試品溶液10mL與內(nèi)標液5mL，置200mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。精密量取20μL注入高效液相色譜儀，于205nm波長處測定雌二醇的吸收值，另精密量取對照品溶液10mL同上處理，測定。計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.829-830。