毒花毛苷K注射液—毒花毛苷K的測定—洋地黃生物測定法

本方法采用洋地黃生物測定法測定毒花毛苷K注射液中毒花毛苷K的效價。

本法系比較洋地黃標準品（S)與供試品（T)對鴿的最小致死量（u/kg)，以測定供試品的效價。

1. 水

2. 氯化納注射液

1. 供試品溶液的制備

精密稱取本品適量，加水制成每1mL中約含0.50mg的溶液，作為供試品溶液。臨用時，精密量取上述供試品溶液適量，加氯化納注射液稀釋。稀釋倍數(shù)應(yīng)調(diào)節(jié)適當（通常為40-60倍)使鴿的平均最小致死量在25-34mL之間。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取毒花毛苷G對照品適量，按標示的無水物含量計算，每1mL加水4mL溶解，作為對照品溶液。臨用時，按上述方法制成稀釋液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

取健康合格的鴿，試驗前16-24小時移去飼料，但仍給予飲水，臨試驗前準確稱重，選取體重在250-400g的鴿，分成兩組，一組為標準品組，一組為供試品組。將鴿仰縛于適宜的固定版上，在一側(cè)翼靜脈處拔除羽毛少許，露出翼靜脈，插入與最小刻度不大于0.02mL的滴定管相連的注射針頭，緩緩注入標準品稀釋液或供試品稀釋液，開始時一次注入0.5mL，然后以每分鐘0.2mL等速連續(xù)注入，至鴿中毒死亡即停止注入。記錄注入稀釋液的總量（mL)，換算成每1kg體重的致死量（mL)中所含效價（u/kg)，取其中10倍量的對數(shù)值作為反應(yīng)值，照生物鑒定統(tǒng)計法中直接測定法計算效價及實驗誤差。本法的可信限率FL（%)不得大于15%。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.373。