依托泊苷注射液—依托泊苷—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定依托泊苷注射液中依托泊苷的含量。

本方法適用于依托泊苷注射液中依托泊苷的測定。

精密量取本品5mL，置 100mL量瓶中，用流動相（乙腈 醋酸鹽緩沖液=30 70)稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置50mL量瓶中用流動相（乙腈 醋酸鹽緩沖液=30 70)稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20μL注入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測依托泊苷的吸收值，計算出其含量。

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

苯基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按依托泊苷峰計算應(yīng)不低于 3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：乙腈＋醋酸鹽緩沖液（pH4.0)= 30 70

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

精密稱取依托泊苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含依托泊苷 0.2mg的溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密量取本品5mL，置 100mL量瓶中，用流動相（乙腈 醋酸鹽緩沖液=30 70)稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置50mL量瓶中用流動相（乙腈 醋酸鹽緩沖液=30 70)稀釋至刻度，搖勻。

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處測定依托泊苷吸收值，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p345。