1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠40只,雌雄各半,體重150~200 g,由中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。自由飲水、進(jìn)食,光照時(shí)間每日9 h以上。飼養(yǎng)1周后使用。
1.2 藥品與試劑 補(bǔ)腎化濁膠囊(滄州市中心醫(yī)院制劑室提供,批號(hào):040504),尿素氮(BUN)檢測(cè)試劑盒(批號(hào):280221),肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(批號(hào):320431),總蛋白(TP)檢測(cè)試劑(批號(hào):281181),白蛋白(ALB)檢測(cè)試劑(批號(hào):251851),以上生化制劑均由中生北控生物科技股份有限公司提供。硫酸慶大霉素注射液(天津金耀氨基酸有限公司提供,2 ml∶8萬U,批號(hào):0403022),目測(cè)八聯(lián)試紙(由廣州市花都高爾寶生物技術(shù)有限公司提供生產(chǎn)日期:20040325),蒸餾水。
1.3 儀器與設(shè)備 全自動(dòng)生化分析儀(美國泰爾康公司生產(chǎn)TECHNICON RAl000型),離心機(jī),一次性注射器(5 ml、1 ml),灌胃器,手術(shù)剪,手術(shù)鑷子,一次性尖頭試管。
1.4 藥液配制 補(bǔ)腎化濁膠囊低劑量混懸液(108 g/L)蒸餾水配制,補(bǔ)腎化濁膠囊高劑量混懸液(324 g/L) 蒸餾水配制。
1.5 分組與用藥 40只大鼠,隨機(jī)分為4組,對(duì)照組、腎損傷模型組、補(bǔ)腎化濁膠囊高劑量組和補(bǔ)腎化濁膠囊低劑量組,每組10只。補(bǔ)腎化濁膠囊高劑量組和補(bǔ)腎化濁膠囊低劑量組分別灌服混懸液,按1 ml·100 g-1·d-1給藥,連續(xù)4周。期間從第21天皮下注射GM 100 mg·kg-1·d-1,共8 d。對(duì)照組、腎損傷模型組:每天灌服同體積水,連續(xù)4周。期間腎損傷模型組從第21天皮下注射GM 100 mg·kg-1·d-1,共8 d。4組均于末次給藥2 h后,取尿和血進(jìn)行測(cè)定。
1.6 觀察指標(biāo) 本實(shí)驗(yàn)中,尿檢采用目測(cè)八聯(lián)試紙半定量法測(cè)定蛋白總量、尿糖、酮體、葡萄糖、尿液pH值。大鼠取血均未麻醉,采用眼眶靜脈取血3~5 ml,離心后取上層血清在全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定BUN(速率法)、Cr(苦味酸法)、TP(雙縮脲法)和ALB(溴甲酚綠法)。處死后觀察腎臟外觀。
1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)量資料以±s表示,采用單因素方差分析,組間比較采用q檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站gydjdsj.org.cn。
2 結(jié)果
2.1 補(bǔ)腎化濁膠囊對(duì)尿液生化指標(biāo)的影響 高、低劑量的補(bǔ)腎化濁膠囊能顯著降低由GM導(dǎo)致的急性腎損傷大鼠尿中蛋白總量、尿糖及酮體,恢復(fù)尿液pH值(P<0.05),與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。表1 4組尿液生化指標(biāo)比較注:與對(duì)照組比較,^P<0.01;與腎損傷模型組比較,#P<0.05,△P<0.01
2.2 補(bǔ)腎化濁膠囊對(duì)血清生化指標(biāo)的影響 高、低劑量的補(bǔ)腎化濁膠囊均能顯著降低GM腎損傷模型大鼠BUN、Cr含量(P<0.01),與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。高、低劑量的補(bǔ)腎化濁膠囊顯著提高GM腎損傷模型大鼠血清TP、ALB總量(P<0.01),較對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。表2 4組血清生化指標(biāo)的影響n=10,±s表3 4組血清蛋白比較注:與對(duì)照組比較,^P<0.01;與腎損傷模型組比較,#P<0.01
2.3 補(bǔ)腎化濁膠囊對(duì)大鼠腎臟器官影響的外觀檢查 對(duì)照組大鼠腎臟大小、形狀均正常,表面光滑,暗紅色,包膜菲薄無粘連,易于剝離,切面皮質(zhì)與髓質(zhì)紋理清楚,腎盂部位黏膜光滑,未見滲出物。模型組則比較肥大出現(xiàn)不同程度的滲出血,皮質(zhì)與髓質(zhì)間出現(xiàn)紅斑。低劑量組有所改善,而高劑量組幾乎看不到上述現(xiàn)象。
3 討論
Cr、BUN是反映腎臟功能的敏感指標(biāo)。有資料表明,Cr、BUN水平與機(jī)體尿酸含量呈正相關(guān),高尿酸血癥可直接導(dǎo)致腎臟器質(zhì)性損傷并且伴有冠狀動(dòng)脈硬化等糖尿病并發(fā)癥[2]。本研究表明補(bǔ)腎化濁膠囊能有效減少急性腎損傷大鼠的Cr、BUN水平,從而抑制高尿酸血癥的形成,減少尿酸鹽對(duì)腎臟的損害。