緒 言
一、病理生理學(xué)實驗的性質(zhì)及內(nèi)容
病理生理學(xué)是一門理論性的，同時也是一門實驗性的科學(xué)，其主要研究方法之一為動物實驗。即在人為控制的條件下，在動物身上復(fù)制各種類似人類疾病的動物模型。觀察疾病時機體的生理機能和生化代謝的變化及其發(fā)生發(fā)展的全部過程，進而闡明疾病發(fā)生發(fā)展的原因和機制，揭示疾病演變和轉(zhuǎn)歸的基本規(guī)律及病理過程的動物身上。采取各種措施進行實驗性治療，為治療學(xué)提供理論和實踐的依據(jù)。
病理生理學(xué)常用的實驗方法有以下兩種：
（一)急性實驗：在短期內(nèi)在動物體內(nèi)復(fù)制疾病模型，觀察其發(fā)生民展及結(jié)局。因為急性實驗常常是在麻醉手術(shù)創(chuàng)傷、失血等條件下進行，因此觀察到的現(xiàn)象，有時不能完全說明整體動物在生理條件下的機能代謝活動規(guī)律。因此在實際應(yīng)用中，我們必須最大限度地縮小和避免其缺點，如要選擇健康的實驗動物，麻醉方法要適宜，手術(shù)要輕巧迅速等。對實驗結(jié)果要進行全面、客觀地分析，才能比較如實的反映患病機體的客觀變化。由于實驗課的學(xué)時有限，大多數(shù)教學(xué)多采用急性實驗。
（二)慢性實驗：這是在指無菌的條件下，給動物實行一定的外科手術(shù)（例如各種瘺管、臟器的切除或移植)，待其恢復(fù)健康后再進行實驗觀察，或者把一定的致病因子作用于動物復(fù)制近似人類的慢性疾病模型，對疾病過程的各種變化進行細(xì)致而長期的動態(tài)觀察。這類方法的最大優(yōu)點是堅持了實驗動物機體的完整性及其與外界環(huán)境的統(tǒng)一性，動物處于比較接近自然的狀態(tài)，因此所觀察到的結(jié)果比較接近實際。但由于慢性實驗時間長，實驗設(shè)備和技術(shù)要求高，動物園的飼養(yǎng)和護理要求較嚴(yán)不宜作為教學(xué)實驗。既使根據(jù)教學(xué)需要做一些慢性實驗，同學(xué)們也只能觀察到慢性實驗全部過程中的一部分。
以上實驗均是用動物復(fù)制疾病模型，它和人體的疾病來比較，仍有一定的距離，因此所得的實驗材料，不能無條件的照搬于人體，還必須和臨床觀察緊密的地聯(lián)系起來。
二、病理生理學(xué)實驗課的目的和要求
病理生理學(xué)實驗課的目的，在于使同學(xué)通過實驗驗證和鞏固部分病理生理學(xué)講授的基本理論，了解和初步掌握復(fù)制疾病模型的實驗方法及病理生理學(xué)實驗的基本操作技術(shù)，并通過實驗逐步培養(yǎng)和提高學(xué)生的觀察事物、分析問題、解決問題的能力。培養(yǎng)同學(xué)對科學(xué)工作的嚴(yán)肅態(tài)度，嚴(yán)密的工作方法和實事求是的工作作風(fēng)。
為了達到實驗課的目的，要求同學(xué)必須遵守以下實驗規(guī)則：
（一)實驗前要仔細(xì)閱讀實驗指導(dǎo)、了解實驗?zāi)康摹嶒灢襟E和主要觀察指標(biāo)及其意義，同時結(jié)合實驗內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)理論，以便對實驗結(jié)果進行分析和討論。
（三)實驗前要仔細(xì)檢查器材、藥品有無短缺或損壞，如發(fā)現(xiàn)上述情況及時報告教師，然后到技術(shù)室登記領(lǐng)取。實驗時，每組同學(xué)必須明分工，各盡其責(zé)、密切合作，使實驗有條不紊地順利進行。各種分工，在不同的實驗中輪流擔(dān)任，使同學(xué)都能在實驗的各個方面得到學(xué)習(xí)和鍛煉。順利進行。各種分工，在不同實驗中輪流擔(dān)任。使同學(xué)都能在實驗的各個方面得到學(xué)習(xí)和鍛煉。
（四)實驗操作時，要按操作規(guī)程使用儀器，要愛護儀器和公共財物，無故損壞者，按超定進行處理。
（五)仔細(xì)、耐心地觀察實驗過程中出現(xiàn)的每一反應(yīng)和變化，實事求是地記錄下來，并運用所學(xué)的理論，對實驗結(jié)果進行分析討論。
（六)實驗結(jié)束后，應(yīng)將實驗所用器材擦洗干凈、清點、整理，如有損壞、缺少，應(yīng)及時報告負(fù)責(zé)老師、說明儲況。同時做好實驗室的清潔衛(wèi)生工作，關(guān)好門、窗、水電等，經(jīng)教師允許方能離開實驗室。
（七)每次實驗后，均應(yīng)告出實驗報告，這是病生教學(xué)實驗的組成部分，因此要求取學(xué)必須作為一項基本功認(rèn)真完成，實驗報告書寫要精確，扼要，全面，字跡清楚，實驗報告包括下列內(nèi)容。
1、系別：年級、小組、姓名、實驗日期
2、實驗題目
3、實驗?zāi)康?/p>
4、實驗動物：種類、性別、體重、數(shù)量，健威狀況或一般倘況。
5、實驗方法：原則上應(yīng)寫出，因?qū)嶒炛笇?dǎo)已寫清楚，一般從略。如果儀器、藥品或方法臨時有所變更，可作簡短說明。
6、實驗結(jié)果：是實驗中最重要的部分。應(yīng)將實驗過程申觀察到的現(xiàn)象實事求是的記述。記述方式可包括為三種(1)文字描述 (2)曲絨圖 (3)表格等。根據(jù)不同的結(jié)果采用最準(zhǔn)確，清楚和適宜的形式。如血壓、呼吸變化，盡量用曲線圖記錄實驗結(jié)果。
7、實驗討論：討論是根據(jù)所學(xué)的理論知識對結(jié)果進行分析、推理、逐步導(dǎo)向結(jié)論的思維過程。討論必須依據(jù)本組的實驗結(jié)果，如果本組因故未能完成，則應(yīng)認(rèn)真總結(jié)本實驗失敗的原因和教訓(xùn)，并另安排時間補做。
8、實驗小結(jié)：通過分析討論。對本次實驗所能驗證的概念、原則和理論，用簡明扼要的文字做一概括。其中也可以包括個人的體會和經(jīng)驗教訓(xùn)。
三、動物實驗的基本知識
(一)實驗動物的捕捉與固定方法
1、大白鼠的捕捉與固定。
先用右手抓住鼠尾放于鼠籠上;在其向前爬行時， 甩左手拇指和食指迅速抓住小白鼠兩耳和頸后部的皮膚，用左手的無名指和小指夾住鼠尾和后肢，這樣即可以用左手將小白鼠固定，右手可作注射或其它實驗操作。
2、兔的捕捉與固定。
先用右手抓住兔背部皮膚，輕輕提起，再用另一只收手托住其臀部使其呈坐位姿勢，放在兔臺上。最好不要提兔耳，以免家兔過度掙扎而將免耳軟骨折斷或失去生理儲況，影響實驗結(jié)果，然后用四根已打好活套的繩子綁住家兔四肢的踝部上一厘米處，將家兔放置呈仰臥位，先將兩前肢綁繩在背后交叉，交叉過來的繩子壓住上肢，分別對稱地綁在兔臺邊緣的圓孔或小立柱上，兩后肢不用交叉。然后將兔嘴固定于兔臺前端的立柱上。
(二)實驗動物的注射法
1、家兔耳緣靜脈注射法
首先將家兔耳緣部的毛剪去或拔去，井用一手壓迫耳靜脈近心端，使靜脈充血，用左手拇指和食指持gydjdsj.org.cn/zhicheng/耳尖，右手持注射器，先從靠耳尖部的血管開始注射，使針尖指向近心端并與皮膚呈10度角，從正面刺入血管，待進入血管后，立即使針頭與血管呈平行位置，用左手將兔耳及針頭固定右手食指和中指夾針管拇指推針心，將藥液注入，若針頭巳進入血管，肉眼可見藥液流入血管內(nèi)。也可向外略抽一下注射器針心。如有血液回流，即可進行藥物注射，如果阻力較大，針尖部皮膚發(fā)自腫脹。說明巳注入血管外，應(yīng)將針頭抽出，重新注射。注射完畢，用棚球壓迫刺口處，再抽出針頭，并輕輕揉壓片刻以防出血。
2、小白鼠腹腔注射;
將小白鼠固定在右手中，右手持汪射器，將針頭從左鼠下腹部朝頭部方向刺入腹腔，回抽注射器時，如無回血或尿液，表示針頭未刺入腹腔臟器和膀胱，即可進行注射。注意針頭不宜靠近上腹部或太深。以免刺破內(nèi)臟。
(三)實驗動物的采血法
1.家兔耳緣靜脈取血法
如要采集少量血液，可按耳緣靜脈注射法取血，也可用二甲苯輕擦耳緣靜脈部。待其充血后，在靠近耳尖部的血管處刺破，兔血即由破口流出，取血后用棉球壓迫止血。
2.小白鼠尾部取血法
將鼠固定后，在鼠尾處1/3與內(nèi)2/3交界處，用剪刀剪去尾尖（或切斷)用手輕輕從尾根部向尾尖部擠幾下，血液即可流出。如要間隔多次采血，每次采血時，可將鼠尾剪去很少一段，取血后用線將鼠尾殘端結(jié)扎，以防繼續(xù)出血。
（四)實驗動物的麻醉方法
實驗動物的麻醉方法，可分為全身麻碎和局部麻醉。我們教學(xué)實驗多采用局部麻醉方法。其方法是，用1%普魯卡因溶液作皮下浸潤麻醉，麻醉范圍稍大于手術(shù)切□，麻醉藥物劑量依切口大小和深度而定。
(五)實驗動物的呼吸血壓描記和常用手術(shù)操作
1、家兔的呼吸描記法
將家兔背位固定于兔臺上，剪去頸前部之毛，局麻后用手術(shù)刀沿頸中線切開皮膚，從胸骨柄上的1厘米處切至喉頭下lcm,切口約5~7cm,用止血鉗分離皮下組織，肌膜和肌肉，分離出氣管后;在其下面穿一粗線，做一虛結(jié)，在氣管軟骨環(huán)間做倒"T"形切口，插入氣管插管，并將續(xù)扎緊固定，用橡皮管連接氣管插管之另一側(cè)臂與換能器以描記呼吸運動曲線。
2、家兔的血壓描記方法
沿氣管一例分離組織。則可露出頸總動脈，將頸總動脈和神經(jīng)分開，分離出約1．5厘米長頸總動脈。在其下方穿二根浸有生理鹽水的細(xì)線備用。動脈插管內(nèi)與相應(yīng)換能器連接并充滿生理鹽水。近心端結(jié)一虛結(jié)，然后于兔耳靜脈注入肝素(1%lmL/kg)，抗凝，在近心端用動脈夾夾住頸總動脈，其與遠(yuǎn)心端結(jié)扎線相距為1.5cm，左手的拇指和食指提起遠(yuǎn)心端的結(jié)扎線，小指墊在頸總動脈下，右手持眼科剪，在靠近遠(yuǎn)心結(jié)扎處剪頸總動脈周徑1/3左右，將已充滿生理鹽水的動脈插管由切口向心臟方向插入動脈立即將近心端虛結(jié)扎緊，使套管緊緊固定在動脈管腔內(nèi)，然后慢慢打開動脈夾，可見描計曲線有明顯波動。如血壓比較平穩(wěn)，可將套管安置于適宜位置，使動脈不致扭曲或拉得過長。將血壓曲線描記下來。
3、家兔頸外靜脈分離插管術(shù)
頸外靜脈分布很淺，在頸部皮下胸鎖乳突肌外緣。將一切開的皮膚，用手在皮膚外面向上損起，即可見到該gydjdsj.org.cn/yaoshi/靜脈，壁薄而粗大呈暗紫色。暴露靜脈以后，沿血管走行方向用血管鉗輕輕分離周圍的結(jié)締組織，頸外靜脈分離出來以后，插管方法與頸總動脈相似，也是向心插入，注意的是，插管前先用動脈夾夾住頸稱脈近心端。待血管充盈后，再結(jié)扎遠(yuǎn)心端。這樣便于剪口和插管。
4、家兔股動脈分離插管術(shù)
家兔背部固定，腹股溝部剪毛，在腹股溝部陰手指觸及動脈搏動明顯處行局麻，然后沿血管行走方向，做4厘米左右切口。用蚊式鉗分離皮下筋腹、肌肉組織后，血管和神經(jīng)即完全暴露，股靜脈位于內(nèi)刨，股神經(jīng)位于外側(cè)，股動脈位于中間偏后，細(xì)心分出股動脈，于其下方穿過兩根細(xì)線，將遠(yuǎn)心端結(jié)扎、近心端用動脈夾夾住，將遠(yuǎn)心端結(jié)扎線輕輕提起，用眼科小剪刀，靠近結(jié)扎處剪股動脈周徑1/3左右，向心方向插入充滿生理鹽水的動脈插管，用線結(jié)扎將插管固定在動脈管腔內(nèi)。
