臨床免疫學及檢驗授課教案-理論課教案:熒光免疫技術(shù)

教案

授課內(nèi)容(章，節(jié))

題 目

第十八章 熒光免疫技術(shù)

授課教師單位

廣醫(yī)檢驗系

教研室

臨床免疫檢驗教研室

職稱

主任技師

授課方式

大課面授

授課時數(shù)

2

授課對象 檢驗系2003本科班

授課時間

2006.09.18

授課地點

12-2A

采用教材版本

《臨床免疫學檢驗》呂世靜主編

教學目的與要求：

1熒光技術(shù)基本原理、熒光基本知識、常用熒光素的特點和

要求。

2熒光抗體技術(shù)要點、抗體要求及標記的原理。

3熒光免疫測定方法的分類及原理。

4熟悉內(nèi)容：熒光顯微技術(shù)基本原理。

5了解內(nèi)容：熒光免疫技術(shù)的進展。

授課內(nèi)容(要點)

1 一般講授熒光的一些基本概念和基本知識：熒光的產(chǎn)生，熒光素的熒光特性，影響熒光的因素，常用熒光素及其特性，合適熒光素的選擇 。

2 重點講解熒光抗體的制備：熒光素與抗體結(jié)合，熒光抗體的純化，熒光抗體的鑒定，學生務(wù)必熒光抗體技術(shù)要點、抗體要求及標記的原理。

3 一般講授執(zhí)業(yè)護士網(wǎng)抗原片的制作：臨床常見標本，標本的固定目的，常用的固定方法。

4重點講解熒光免疫測定方法的分類及原理：直接法，間接法，補體結(jié)合法的原理。

5 簡單介紹熒光免疫技術(shù)的其它發(fā)展應(yīng)用：流式細胞儀，熒光偏振免疫分析技術(shù)，熒光免疫技術(shù)在生物芯片中的應(yīng)用。

6 重點講解新發(fā)展中時間分辨免疫熒光技術(shù)：時間分辨免疫熒光技術(shù)基本原理，時間分辨熒光測定的特點、測定技術(shù)類型。

7簡單介紹熒光免疫技術(shù)的最新發(fā)展應(yīng)用：化學發(fā)光，上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)。

時間

分配

2h

講課重點和難點（采用何種方式或方法來解決)

重點：1熒光抗體技術(shù)要點、抗體要求及標記的原理。

2 熒光免疫測定方法的分類及原理。

難點：熒光抗體技術(shù)的方法和原理。

采用方式或方法：

1 利用網(wǎng)絡(luò)資源，學習理解免疫反應(yīng)的原理。

2 自行制作的動畫展現(xiàn)免疫反應(yīng)的微觀世界，讓學生加深理解反應(yīng)原理。

3介紹學生閱讀有關(guān)參考文獻，增加知識面，拓展視野，加深理解，易于記憶。

1)周光炎.免疫學，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學檢驗——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學檢驗，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

教學過程設(shè)計：（授課中對以下內(nèi)容采取的措施)

1．  應(yīng)用畫圖解釋熒光的產(chǎn)生，熒光素的熒光特性，影響熒光的因素，讓學生理解熒光產(chǎn)生的動態(tài)過程。

2．  利用表格解釋熒光素的選擇和各種熒光素的特性。

3．  通過流線圖解釋熒光抗體的制備過程，在講授過程中，應(yīng)詳細解釋每一步的影響因素與注意事項。

4．  利用直觀圖、動畫等多媒體技術(shù)，解釋熒光抗體技術(shù)的檢測原理，本內(nèi)容是學生撐握的難點，重點要展示微觀反應(yīng)原理。

5．  利用視頻技術(shù)，展示熒光抗體檢測技術(shù)的操作過程和檢測流程。

6．  采用對比的方法講解熒光抗體技術(shù)中直接法、間接法和補體結(jié)合法以及時間分辨免疫熒光技術(shù)基本原理，時間分辨熒光測定的特點、測定技術(shù)類型。使學生更容易理解各種檢測法的特性和應(yīng)用情況。

7．  簡單介紹熒光免疫技術(shù)的進展。

2．啟發(fā)引導學生思維：

1) 標記免疫技術(shù)中各種技術(shù)的異同點。例如ELISA、放射免疫、熒光免疫和金標記免疫等

2)復(fù)習抗原抗體反應(yīng)、凝聚反應(yīng)、沉淀反應(yīng)的特點等基本知識，引導學生回顧學過的知識，提問學生：凝聚反應(yīng)、沉淀反應(yīng)的共同點是什么？其檢測靈敏度達到什么程度？使學生容易理解標記免疫技術(shù)的特點。

3) 學生在充分理解熒光抗體技術(shù)的原理及特點基礎(chǔ)上，引導學生設(shè)計臨床測定不同標志物的方法。

3．采用英語專業(yè)詞匯：

1)  熒光免疫技術(shù) fluorescence Immunoassay

2)  異硫氰酸熒光素 fluorescein isothiocyanate,FITC

3)  四乙基羅丹明 rhodamine B200,RB200

4)  四甲基異硫氰酸羅丹明 tetramethyl rhodamine isothiocyanate,TRITC

5)  藻紅蛋白 phycoerythrin,PE

6)  時間分辨熒光免疫測定 time-resolved fluorescence immunoassay,TR-FIA

7)  熒光酶免疫測定 fluorescence enzyme immunoassay,FEIA

4．指導學生自學：

1) 熒光顯微鏡的使用

2) 熒光抗體技術(shù)中抗原的來源及固定方法及對檢測的影響。

5．學科進展內(nèi)容：

1) 熒光免疫技術(shù)在生物芯片中的應(yīng)用和上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)是免疫熒光技術(shù)的新發(fā)展，特別是上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)，目前僅見國外報道，是值得關(guān)注的新動向

2) 向?qū)W生扼要介紹生物芯片技術(shù)和上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)。

課堂提問設(shè)計：

1)  凝聚反應(yīng)和沉淀反應(yīng)的特點是什么？檢測靈敏度如何？

2)  什么是標記免疫技術(shù)？

3)  什么是熒光？什么是熒光素？

4)  熒光素如何與抗體結(jié)合？

5)  怎樣進行標記熒光抗體的純化？如何鑒別是否達到純化要求？

教師與學生互動的設(shè)計：

講授與提問結(jié)合，舉臨床實例說明問題，由淺入深，引導學生，提高學生學習興趣，調(diào)動學生學習積極性。

教學方法與手段（采用何種直觀教具和數(shù)量)(請打√)

板書設(shè)計

1 凝聚反應(yīng)、沉淀反應(yīng)：Ag+Ab-----AgAb―――觀察

2 標記免疫技術(shù)：Ag+Ab*-----AgAb*―――測量*，

或：Ag*+Ab-----Ag*Ab―――測量*，

3 熒光的產(chǎn)生：

  λ2>λ1

幻燈 錄像 √CAI課件 √動畫  √視頻   √網(wǎng)絡(luò)

其它：

課時具體安排：

1 標記免疫技術(shù)概念、分類，熒光免疫技術(shù)的概念分類，5min

2 熒光技術(shù)基本原理、熒光基本知識、常用熒光素的特點和要求。20min

3熒光抗體技術(shù)要點、抗體要求及標記的原理。20min

4熒光免疫測定方法的分類及原理。熒光抗體技術(shù)基本原理。20nin

5 時間分辨免疫熒光技術(shù)。10min

6熒光免疫技術(shù)的進展。5min

教學改革措施（授課形式、課堂提問、思考題、復(fù)習提綱、測試題)

1)面授與提問結(jié)合，強調(diào)須掌握和熟悉的內(nèi)容，可課后給予思考題及測試題。

2)建議學生上網(wǎng)，通過我們自行制作的網(wǎng)絡(luò)課件，加深對課程內(nèi)容的理解。

輔導的問題與難點：

1熒光抗體技術(shù)要點、抗體要求及標記的原理。

2www.med126.com 熒光免疫測定方法的分類及原理。

3熒光抗體技術(shù)的方法和原理。

備課主要參考資料（圖書、文獻)：

1)周光炎.免疫學，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學檢驗——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學檢驗，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

授課教師對此次授課的自我評價：

本課是臨床免疫檢驗課程中基礎(chǔ)理論的主干課，要求教師有較扎實標記免疫技術(shù)理論基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用經(jīng)驗。此次講授自己能緊緊抓住熒光免疫技術(shù)特點這一主線，重點放在反應(yīng)原理和臨床應(yīng)用的講授上。通過多媒體中的圖片、動畫、視頻播放等更形象地展示抗原抗體反應(yīng)的微觀過程，通過彩圖及流線圖更清晰地講解熒光免疫的操作過程和影響因素。最后，結(jié)合臨床經(jīng)驗介紹實際項目的檢測（例如CD4檢測等)。

講授過程邏輯性強，條理性好，語言表達清晰，能適當介紹相關(guān)的專業(yè)英語詞匯。在基礎(chǔ)理論講授的同時，向?qū)W生介紹有關(guān)熒光免疫技術(shù)的相關(guān)研究，如從FITC熒光素到Eu3+再到自動化儀器中所應(yīng)用的MuP熒光素的應(yīng)用，從而擴大學生的知識面。在授課形式上，PPT結(jié)合多媒體播放及適當?shù)陌鍟�有機的結(jié)合，使內(nèi)容更形象、更生動、更具體，學生更易于理解。

學生評價：

條理清楚,邏輯性強,講授深入淺出,能將微觀難懂的內(nèi)容講授得通俗易懂.講課形式生動活潑,并結(jié)合臨床實際,使學生更加容易理解.加入新進展內(nèi)容,擴大知識面。

教研室主任評價：

教案書寫要求：文字通暢，書寫工整或電腦打印。