一、對角質(zhì)層抗原與角質(zhì)層自身抗體、角蛋白抗原的研究
角朊細胞從上到下可分為角化（質(zhì))層、粒層和基底層。角質(zhì)層位于表皮外層，是一種特殊的結構，由許多已角化的扁平細胞組成。電鏡下僅見增厚的胞膜和緊密排列的張力微絲。角質(zhì)層很少或根本不與免疫系統(tǒng)相通。應用免疫熒光技術表明，所有正常人血中都含有低滴度的抗角質(zhì)層自身抗體，免疫熒光呈局灶狀或顆粒狀分布于角質(zhì)層內(nèi)。在體外，角質(zhì)層抗體與其產(chǎn)生者自身的角質(zhì)層發(fā)生反應，因而證明是自身抗體，但在正常人體內(nèi)不發(fā)生反應。下列兩種情況可使其在體內(nèi)與角質(zhì)層發(fā)生反應：①外傷；②銀屑病鱗屑內(nèi)。銀屑病人血清中的抗角質(zhì)層自身抗體與正常人無差別，但在銀屑病的鱗屑浸出物中發(fā)現(xiàn)有Ig。這種抗體是能與補體結合的IgG和IgM型抗體。
角質(zhì)層抗原與角化細胞的細胞膜或/和細胞間質(zhì)有關，近年來通過對角蛋白多肽的研究發(fā)現(xiàn)至少一些角質(zhì)層的自身抗體是針對角蛋白的。
抗角質(zhì)層自身抗體的應用：抗角質(zhì)層自身抗體存在于正常人血清中，但并不引起疾病。該種抗體可能對于清除損傷了的表皮細胞有一定的作用，銀屑病中角朊細胞的過度增生可能與這種抗體的沉積有關。與抗角質(zhì)層自身抗體有關的疾病尚有類風濕關節(jié) 炎、關節(jié) 病型銀屑病、外傷等。
制備的抗角蛋白抗體：近10年來，應用免疫動物的方法制備了多種抗角蛋白多抗或單抗，可以針對不同分子量的角蛋白成分。角蛋白是上皮細胞的中間絲成份，抗角蛋白抗體可以作為上皮組織和由上皮組織起源的腫瘤的有用標記之一。
二、對天皰瘡的研究
天皰瘡是一類自身免疫性疾病，其臨床特點為皮膚和粘膜的自發(fā)性的、松弛性的水皰形成，病理特點是由棘層松解引起的表皮內(nèi)水皰。臨床上可分為尋常型（PV)、紅斑型、落葉型（PE)、增殖型、皰疹樣型五型。
1．免疫熒光檢查 應用IIF檢查，天皰瘡病人中85%～90%血清中有抗表皮棘細胞間抗體（Pab)存在，活動期更高。血清中Pab滴度與病情嚴重程度相平行。免疫熒光圖形是棘細胞間均一的線型。作IIF檢查時，底物很重要。Michael等比較猴食道及豚鼠食道上皮作為PV和PF的底物情況，發(fā)現(xiàn)PV以猴食道上皮作底物較好，而PF則以豚鼠食道上皮作底物較好。唐書謙等認為作IIF時首選人表皮和猴食道上皮，而小白鼠食道及大白鼠舌粘膜亦可作為一般常用的底物。我們的經(jīng)驗是，-20℃保存1年的冰凍人包皮切片作底物時，其抗原性無明顯減弱，但時間過長，則要影響其滴度；冰凍切片后的皮膚暴露于室溫（20℃±)3h即可完全破壞其抗原。
取天皰瘡皮損周圍皮膚作DIF，對天皰瘡的診斷更有意義。如天皰瘡的皮損廣泛，也可取外觀“正�！钡钠つw，而不一定要取皮損邊緣的皮膚，但皮損邊緣的皮膚熒光抗體稀釋度較“正�！逼つw者為高。
2．免疫熒光顯示的部位 在PV中，免疫球蛋白附著的部位一般在基底細胞上棘細胞下層；而在PF中，免疫球蛋白附著的部位在較上層的棘細胞間。與Pab結合的天皰瘡抗原位于表皮細胞表面，其細胞間的熒光是細胞表面熒光的延伸。免疫電鏡證明天皰瘡抗原可能與橋粒列明顯關系。醫(yī)學.全在線gydjdsj.org.cn
除用免疫熒光法可證明有Pab存在外，目前也用酶標法、ABC法等。
天皰瘡抗體主要為IgG，也有部分為IgM和IgA。應用DIF檢查時，也發(fā)現(xiàn)有C3沉積，但目前認為可能是繼發(fā)于Ig的沉積。
3．天皰瘡抗體與天皰瘡的關系可由以下幾方面來證明①DIF證明天皰瘡病人皮損周圍及“正�！逼つw處有IgG的沉積，且其熒光強度與病情的嚴重程度相平行；②血清中的Pab滴度與病情的嚴重程度相平行；③進行皮膚器官培養(yǎng)時，加入純化的Pab可導致天皰瘡樣的棘層松解；④用血漿交換法去除Pab可導致天皰瘡的緩解。
天皰瘡抗體是針對表皮細胞膜多糖萼的抗體，其在體內(nèi)與表皮細胞膜結合后可能使表皮細胞釋放蛋白溶解酶如u –PA,u-PA在天皰瘡發(fā)病機理中的作用：1)角朊細胞培養(yǎng)時加入Pab后，上清液中u-Pa ↑；2)抗u-PA抗體可阻止棘層松解發(fā)生；3)u-PA的抑制劑如α2-巨球蛋白、STBI以及合成抑制劑Foy、Foy-305、FUT-175、止血芳酸等均能在一定程度上抑制Pab導致棘層松解的產(chǎn)生。
4．天皰瘡樣抗體與血型抗體 Ahmed及Workman檢查1500份正常血清，發(fā)現(xiàn)14例有低滴度的抗表皮細胞間抗體，但無天皰瘡的臨床表現(xiàn)，其中9例用A、B型血型物質(zhì)吸收后熒光消失，說明其可能為A、B血型抗體，A、B、H血型抗體存在于正常皮膚和口腔粘膜的棘層和顆粒層，但不存在于基底層和角化層，其分布同天皰瘡抗原。藥疹、燒傷等可有天皰瘡樣抗體，其與Pab的區(qū)別在于前者稀釋度較低，熒光染色圖形為粗顆粒狀、不均一，且部分可用A、B血型物質(zhì)吸收，而Pab的熒光圖型為連續(xù)均一的線型，用A、B血型物質(zhì)吸收后滴度不變。
