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藥師資格考試藥物分析西藥分析—縮宮素生物檢定法 | |||||
| 來(lái)源：醫(yī)學(xué)全在線(xiàn) 更新：2007-5-16 考研論壇 | |||||
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標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制 迅速精密稱(chēng)取垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品適量，注意避免吸潮，先加少量0.25％醋酸溶液，仔細(xì)研磨，移置硬質(zhì)大試管中,再精密加0.25％醋酸溶液使成每1ml中含縮宮素1單位的溶液。管口輕放一玻璃塞，浸入沸騰的水中，時(shí)時(shí)振搖，加熱5分鐘取出,迅速冷卻，濾過(guò)，濾液分裝于適宜的容器內(nèi)，4～8℃貯存，如無(wú)沉淀析出，可在3個(gè)月內(nèi)使用。 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的配制 試驗(yàn)當(dāng)日，精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，按高低劑量組(ds<[2]>，ds< [1]>)加0.9％氯化鈉溶液配成兩種濃度的稀釋液，一般高濃度稀釋液可配成每1ml中含0.01～0.02單位，高低劑量的比值(r)一般不得大于1:0.7。調(diào)節(jié)劑量使低劑量能引起子宮收縮，一般在20～50mm；高劑量應(yīng)不致使子宮收縮達(dá)到極限,一般為50～85mm,且高低劑量所致子宮的收縮應(yīng)有明顯差別。 供試品溶液與稀釋液的配制 按供試品的標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)(A<[T]>),照標(biāo)準(zhǔn)品溶液與其稀釋液的配制法配成，高低兩種濃度的稀釋液，其比值(r)應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品相等,供試品和標(biāo)準(zhǔn)品高低劑量所致的反應(yīng)均值應(yīng)相近。 子宮肌蓄養(yǎng)液的配制醫(yī)學(xué).全.在.線(xiàn)網(wǎng)站gydjdsj.org.cn 試驗(yàn)當(dāng)日，取氯化鈉9g、氯化鉀0.42g、 氯化鈣（按無(wú)水物計(jì)算）0.06g與葡萄糖0.5g，加水700ml使溶解，另取碳酸氫鈉0.5g，加水約200ml溶解 后，緩緩傾注于前一溶液中，隨加隨攪拌，最后加水適量使成1000ml。 供試用動(dòng)物 取健康無(wú)傷的成年雌性大鼠，斷乳后即與雄鼠隔離，出生后不超過(guò) 3個(gè)月,體重160～240g。試驗(yàn)當(dāng)日，選擇陰道涂片在動(dòng)情前期的動(dòng)物，也可用雌性激素處理使子宮涂片為動(dòng)情前期或動(dòng)情期的動(dòng)物。 檢定法 取選定的大鼠迅速處死，剖腹取出子宮，仔細(xì)分離附在子宮肌上的結(jié)締組織,注意避免因牽拉使子宮肌受損。在子宮分叉處剪下左右2條，取一條將其下端固定于離體器官恒溫水浴裝置的浴杯底部，上端用線(xiàn)與記錄裝置相連，以描記子宮收縮；浴杯中加入一定量的子宮肌蓄養(yǎng)液(約30～50ml)，連續(xù)通入適量空氣。蓄養(yǎng)液應(yīng)調(diào)節(jié)至32～35℃之間并保持恒溫(±0.5℃)，子宮放入浴杯后，靜置約15分鐘,按次序準(zhǔn)確注入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品或供試品兩種濃度的稀釋液（0.3～0.8ml），待子宮肌收縮至最高點(diǎn)開(kāi)始松馳時(shí)（約60～90秒鐘），放去蓄養(yǎng)液并用蓄養(yǎng)液洗滌一次，再加入等量蓄養(yǎng)液，靜置；相鄰兩次給藥的間隔時(shí)間應(yīng)相等(約3～5分鐘)，每次給藥應(yīng)在前一次反應(yīng)恢復(fù)穩(wěn)定以后進(jìn)行。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液和供試品稀釋液各取高低兩個(gè)劑量(ds<[2]>、 ds<[1]>、dT<[2]>、dT<[1]>)為一組，按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的次序輪流注入每組四個(gè)劑量，重復(fù)4～6 組。測(cè)量各劑量所致子宮收縮的高度，照生物檢定統(tǒng)計(jì)法（附錄ⅩⅣ）中的量反應(yīng)平行線(xiàn)測(cè)定法計(jì)算效價(jià)及實(shí)驗(yàn)誤差。 本法的可信限率(FL％)不得大于10％。 |
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