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中國生物制品規(guī)程:殘留聚乙二醇(PEG)含量測定

1試劑1.1 PEG(MW4000或6000)。1.20.5mol /L高氯酸(HClO4)溶液。1.3 5%BaCl2溶液。1.40.1mol /L碘溶液。2 操作2.1 取1ml樣品,在靈敏度允許的范圍內(nèi),先將樣品稀釋到蛋白質(zhì)濃度≤1%,加入5.0ml 0.5mol /L高氯酸溶液,15分鐘后,用4000r/min,離心10分鐘,取上…

1試劑

1.1 PEG(MW4000或6000)。

1.20.5mol /L高氯酸(HClO4)溶液。

1.3 5%BaCl2溶液。

1.40.1mol /L碘溶液。

2 操作

2.1 取1ml樣品,在靈敏度允許的范圍內(nèi),先將樣品稀釋到蛋白質(zhì)濃度≤1%,加入5.0ml 0.5mol /L高氯酸溶液,15分鐘后,用4000r/min,離心10分鐘,取上清液(如蛋白濃度過高,上清混濁,則要過濾至清)。

2.2 PEG測定

于4ml上清液中加入1.0ml5%BaCl2和0.5ml的0.1mol/L碘溶液,反應(yīng)15分鐘后,進行比色。記錄各樣品的A535值。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

gydjdsj.org.cn/pharm/≤1%蛋白質(zhì)溶液,另入PEG合成10~80μg/ml 溶液。根據(jù)樣品的大致濃度,用去除蛋白質(zhì)后溶液制劑作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.4 根據(jù)樣品讀數(shù),從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出PEG含量。

3 計算

樣品中PCG濃度%(g/ml)=樣品稀釋倍數(shù)×查得標(biāo)準(zhǔn)曲線相應(yīng)的PEG濃度

附注

1.整個比色過程應(yīng)在試劑加入以后的15~45分鐘內(nèi)完www.med126.com成,否則將要影響結(jié)果。

2.本方法的靈敏度隨被測定PEG的分子量的增加而提高。

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