1 試劑
1.1 丙烯酰胺溶液
取丙烯酰胺14g，雙丙烯酰胺0.367g，加蒸餾水至50ml。
1.2 緩沖液
Ph7.2，0.2mol /L PB-0.2%SDS：取NaH2PO4·2H2O17.8g,Na2HPQ4·12H2O103g,SDS4g，加蒸餾水至2000ml。
1.3 樣品結(jié)合液
取10%SDS4ml,0.2mol/L PB0.2ml，甘油10ml，加蒸餾水至20ml。
1.4 電極緩沖液
取上述1.2項(xiàng)緩沖液稀釋1倍。
1.5 固定液
取甲醇400ml，冰醋酸70ml，加蒸餾水至1000ml。
1.6 染色液
取考馬斯亮藍(lán)2.5g，溶于500ml甲醇中，加冰醋酸70ml，再加蒸餾水至1000ml。
1.7 脫色液
取冰醋酸70ml，甲醇50ml，加蒸餾水至1000ml。
1.8 干燥液
取甘油30ml，甲醇200ml，加蒸餾水至1000ml。
2 操作
2.1 樣品處理
取一定蛋白質(zhì)濃度的樣品0.1ml，加樣品結(jié)合液0.1ml，100℃翥沸1～2分鐘，或37℃2小時(shí)，冷卻。
2.2 凝膠板制備
按下列比例制備所需量凝膠溶液∶0.2mol /L PB∶丙烯酰胺溶液∶水∶1.5%過硫酸銨=2∶1∶0.8∶0.25。最后加1～2滴四甲基乙二胺（TEMED)，混勻后立即將膠液加入電泳槽的玻璃板間，要避免產(chǎn)生氣泡。
2.3 加樣
于每一樣品孔內(nèi)加入已經(jīng)處理過的樣品25μg蛋白。
2.4 電泳
電泳條件為每個(gè)gydjdsj.org.cn/Article/樣品孔的電流恒定為2～3mA。當(dāng)溴酚藍(lán)電泳至底部時(shí)停止電泳。
2www.med126.com.5 固定
將電泳后的膠板放入固定液中，過夜。
2.6 染色及脫色
于染色液中染色1～2小時(shí)，然后置脫色液中進(jìn)行脫色，直至底色成為無色為止。
2.7 干燥保存
用適宜方法干燥。
3 結(jié)果計(jì)算
將干燥前或后的膠板用掃描儀于575nm或520nm處對(duì)每一樣品進(jìn)行掃描，得出（或計(jì)算出)樣品中F（ab)2的百分含量。
