細菌和紅細胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后,可出現(xiàn)肉眼可見的凝集(agglutination)現(xiàn)象。早在1896年,Widal就利用傷寒病人的血清與傷www.med126.com寒桿菌發(fā)生特異性凝集的現(xiàn)象,有效地診斷傷寒病。至1900年Landsteriner在特異性血凝現(xiàn)象的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了人類血型,并于1930年獲得了諾貝爾獎金。凝集試驗靈敏度高,方法簡便,迄今已成為通用的免疫學(xué)試驗,廣泛應(yīng)用于臨床檢驗。
凝集反應(yīng)的發(fā)生分兩階段:①抗原抗體的特異結(jié)合;②出現(xiàn)可見的顆粒凝集。通常,細菌和紅細胞等顆粒抗原在懸液中帶弱負電荷,周圍吸引一層與之牢固結(jié)合的正離子,外面又排列一層松散的負離子層,構(gòu)成一個雙層離子云。在松散層內(nèi)界和外界之間的電位差形成Z電位。溶液中的離子強度愈大,Z電位也就愈大。Z電位使顆粒相互排斥。當(dāng)特異抗體與相應(yīng)抗原顆;パa結(jié)合時,抗體的交聯(lián)作用克服了抗原顆粒表面的Z電位,而使顆粒聚集在一起。但當(dāng)抗體分子太少,不足以克服相當(dāng)厚度的離子云層時,則不能使顆粒聚集。因此在凝集反應(yīng)中,IgM類抗體的作用比IgG類抗體要大數(shù)百倍,所以IgG類抗體常出現(xiàn)不完全反應(yīng),gydjdsj.org.cn/zhuyuan/即不可見的抗原抗體反應(yīng)。這種抗體有時又稱不完全抗體。不完全的含義是:可與抗原牢固結(jié)合,但因其分子量較小,不能起到由橋聯(lián)作用而形成的可見凝集現(xiàn)象。在試驗過程中,為促使凝集現(xiàn)象的出現(xiàn),可采取以下措施:增加蛋白質(zhì)或電解質(zhì),降低溶液中離子強度以縮短顆粒間的距離;增加試液的粘滯度,如加入右旋糖酐或葡聚糖等;用胰酶或神經(jīng)氨酸酶處理,改變細胞的表面化學(xué)結(jié)構(gòu);以離心方法克服顆粒間的排斥等。
凝集試驗是一個定性的檢測方法,即根據(jù)凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)與否判定結(jié)果陽性或陰性;也可以進行半定量檢測,即將標(biāo)本作一系列對倍稀釋后進行反應(yīng),以出現(xiàn)陽性反應(yīng)的最高稀釋度作為滴度。由于凝集反應(yīng)方法簡便,敏感度高,因而在臨床檢驗中被廣泛應(yīng)用。
在免疫學(xué)技術(shù)中,凝集反應(yīng)可分為直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)兩大類。自身紅細胞凝集試驗和抗球蛋白參與的凝集試驗是兩種特殊的凝集反應(yīng)。