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病理學:第十二節(jié) 腫瘤的病理學檢查方法

腫瘤的病理學檢查www.gydjdsj.org.cn為極其重要的腫瘤診斷方法之一。病理學檢查可以確定腫瘤的診斷、組織來源以及性質(zhì)www.gydjdsj.org.cn/yishi/和范圍等,為臨床治療提供重要的依據(jù)。腫瘤的病理學檢查方法包括:一、常規(guī)的病理形態(tài)學檢查1.我國醫(yī)務工作者研制成食管細胞采取器…

腫瘤的病理學檢查www.gydjdsj.org.cn為極其重要的腫瘤診斷方法之一。病理學檢查可以確定腫瘤的診斷、組織來源以及性質(zhì)www.gydjdsj.org.cn/yishi/和范圍等,為臨床治療提供重要的依據(jù)。腫瘤的病理學檢查方法包括:

一、常規(guī)的病理形態(tài)學檢查

1.我國醫(yī)務工作者研制成食管細胞采取器(食管拉網(wǎng)法)檢查食管癌賁門癌(陽性確診率為87.3%~94.2%)。還用鼻咽乳膠球細胞涂片、負壓吸引細胞法及泡沫塑料海綿涂片法等采取鼻咽分泌物檢查鼻咽癌,提高了陽性診斷率(陽性率為88%~92%)。用胃加壓沖洗法采取胃內(nèi)容物檢查胃癌,也使陽性診斷率有了顯著的提高。

2.活體組織檢查 從患者身體的病變部位取出小塊組織(根據(jù)不同情況可采用鉗取、切除或穿刺吸取等方法)或手術(shù)切除標本制成病理切片,觀察細胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,以確定病變性質(zhì),作出病理診斷,稱為活體組織檢查(biopsy),簡稱活體。這是診斷腫瘤常用的而且較為準確的方法。近年來由于各種內(nèi)窺鏡(如纖維胃鏡、纖維結(jié)腸鏡、纖維支氣管鏡等)和影像診斷技術(shù)的不斷改進,不但可以直接觀察某些內(nèi)腫瘤的外觀形態(tài),還可在其指引下準確地取材,進一步提高了早期診斷的陽性率。

二、新開展的檢查方法

1.免疫組織化學檢查 免疫組化是最近10多年來迅速發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。它已被廣泛運用腫瘤研究和診斷,其原理是利用抗原與抗體的特異性結(jié)合反應來檢測組織中的未知抗原或者抗體,主要是腫瘤相關(guān)抗原(腫瘤分化抗原和腫瘤胚胎抗原),借以判斷腫瘤的來源和分化程度,協(xié)助腫瘤的病理診斷和鑒別診斷。目前常用的染色方法有過氧化物酶-抗過氧化物酶法,即PAP法(peroxidaseantiperoxidase technique)和卵白素-生物素-過氧化物酶復合物法,即ABC法(avidin-biotin-peroxidase complex technique)。利用免疫組織化學方法已經(jīng)可以對許多常規(guī)方法難以判斷其來源的腫瘤加以鑒別。例如檢測細胞骨架的中間絲(intermediate filament),其直徑平均為10nm,介于微管和微絲之間。中間絲有五類:即神經(jīng)原纖維、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白、結(jié)蛋白(desmin)、波形蛋白(vimentin)和角蛋白(keratin)。它們各有生物化學和免疫學特性,并分別存在于不同類型的細胞中,故具有相對的特異性,可用來協(xié)助診斷相應的神經(jīng)細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、橫紋肌和平滑肌、間葉組織和上皮細胞來源的腫瘤。利用激素和激素受體的特異性結(jié)合,還可以對乳腺癌等激素依賴性腫瘤的雌激素受體、孕激素受體的水平進行免疫組化測定。雌激素受體陽性者對于內(nèi)分泌治療的效果較好,預后也優(yōu)于受體陰性的病人。

目前能用于腫瘤輔助診斷和鑒別診斷的抗體已不勝枚舉。由于經(jīng)驗的積累,過去認為在診斷某些腫瘤上具有特異性的抗體也不是那樣特異了。因此在判斷結(jié)果時必須緊密地結(jié)合形態(tài)學和臨床改變。

2.電子顯微鏡 檢查迄今尚未發(fā)現(xiàn)可據(jù)以診斷腫瘤和惡性腫瘤的特異性的超微結(jié)構(gòu)改變。因此要鑒別是否為腫瘤和腫瘤的良惡性仍主要靠光鏡觀察。但電鏡在確定腫瘤細胞的分化程度,鑒別腫瘤的類型和組織發(fā)生上可起重要作用。例如鑒別分化差的癌及肉瘤;區(qū)分各種惡性小圓細胞腫瘤,如神經(jīng)母細胞瘤、Ewing肉瘤、胚胎性橫紋肌肉瘤惡性淋巴瘤及未分化小細胞癌。

在電鏡下,癌細胞之間常見較多的橋粒連接或橋粒樣連接,因而可與肉瘤相區(qū)別。在惡性小圓細胞腫瘤中,各類腫瘤也有其超微結(jié)構(gòu)特點,如神經(jīng)母細胞瘤常見大量樹狀細胞突,在瘤細胞體及胞突中均可查見微管和神經(jīng)分泌顆粒;Ewing肉瘤的瘤細胞常分化差,胞漿內(nèi)細胞器很少,但以大量糖原沉積為其特點:胚胎性橫紋肌肉瘤可見由肌原纖維和Z帶構(gòu)成的發(fā)育不良的肌節(jié);小細胞癌?梢娂毎g連接和胞漿內(nèi)神經(jīng)分泌顆粒;惡性淋巴瘤除可見發(fā)育不同階段淋巴細胞的超微結(jié)構(gòu)特點外,不見細胞連接、神經(jīng)分泌顆粒、樹狀胞突和糖原沉積,從而可與其他小圓細胞腫瘤區(qū)別。

3.流式細胞術(shù)(flow cytometry)流式細胞術(shù)是近年來發(fā)展起來的一種快速定量分析細胞的新技術(shù),目前已廣泛用于腫瘤研究,特別是應用于瘤細胞DNA含量的檢測。許多資料表明,實體惡性腫瘤的DNA倍體大多為非整倍體或多倍體,所有良性病變都是二倍體。檢測異常DNA含量不但可作為惡性腫瘤的標志之一,且可反映腫瘤的惡性程度及生物學行為。

4.圖像分析技術(shù) 病理形態(tài)學的觀察基本上是定性的,缺乏精確而更為客觀的定量標準。圖像分析技術(shù)(image analysis)的出現(xiàn)彌補了這個缺點。隨著電子計算機技術(shù)的發(fā)展,形態(tài)定量技術(shù)已從二維空間向三維空間發(fā)展。在腫瘤病理方面圖像分析主要應用于核形態(tài)參數(shù)的測定(區(qū)別癌前病變和癌;區(qū)別腫瘤的良惡性;腫瘤的組織病理分級及判斷預后等),DNA倍體的測定,顯色反應(如免疫組織化學)的定量等方面。

5.分子生物學技術(shù) 十余年來分子生物學腫瘤研究領(lǐng)域引起了一場革命。重組DNA技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)和DNA測序等新技術(shù)在腫瘤的基因分析和基因診斷上已經(jīng)開始應用。例如對惡性淋巴瘤,利用Southern印跡雜交技術(shù)和PCR方法,可以對樣本淋巴組織中是否存在單克隆性的增生做出判斷,從而協(xié)助形態(tài)學診斷。這些技術(shù)還被用于腫瘤的病因和發(fā)病學研究。

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