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感謝大夫?yàn)槲铱焖俳獯稹撊绾沃委熀头乐?/p>
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（一)細(xì)菌學(xué)檢查用流產(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物或陰道分泌物等材料制成菲薄的涂片，干燥、火焰固定后，用沙黃一孔雀綠染色法染色，布魯氏菌被染成淡紅色、小球狀桿菌，其他細(xì)菌或細(xì)胞為綠色或藍(lán)色。也可觀察其培養(yǎng)特性。小動(dòng)物感染試驗(yàn)：應(yīng)用豚鼠接種分離的布魯氏菌，比用培養(yǎng)基分離可靠，因病料內(nèi)細(xì)菌不多時(shí)，用培養(yǎng)基分離培養(yǎng)常不能生長。正式試驗(yàn)時(shí)，取子宮分泌物、乳汁流產(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物、羊水、精液或病變組織，制成混懸液等，給2只體重350 - 400g的豚鼠皮下或腹腔接種，一般為0.5-1.0 - 2.0mL，接種后第2周開始采血，以后，每隔7-10d采血1次，檢查血清抗體，如凝集價(jià)達(dá)1:5以上時(shí)，即認(rèn)為是陽性反應(yīng)，證明已感染了布魯氏菌，此時(shí)，可從豚鼠心血中分離培養(yǎng)細(xì)菌，即使分離不到細(xì)菌，也可判為已感染布魯氏菌。通常一只在接種后第三周剖殺，另一只在第6周剖殺，如見到鼠蹊淋巴結(jié)與腰下淋巴結(jié)腫大，脾腫大、表面粗糙，有結(jié)節(jié)狀病灶，肝臟有灰白色細(xì)小平坦的壞死小結(jié)節(jié)，更可進(jìn)一步證實(shí)試驗(yàn)的陽性結(jié)果；若注射的豚鼠不發(fā)病，剖檢無病變，臟器分離培養(yǎng)陰性，可報(bào)告陰性。如為公豚鼠，腹腔接種時(shí)，可引起睪丸炎。如在接種后第3個(gè)月末，豚鼠不發(fā)病，未死亡，血清反應(yīng)仍陰性，可報(bào)告為陰性。（二)血清學(xué)試驗(yàn)1．凝集反應(yīng) 動(dòng)物感染布魯氏菌的4-5d后，血液中即出現(xiàn)凝集素，隨后凝集滴度逐漸增高，能持續(xù)1-2年或更久，以試管凝集反應(yīng)檢查時(shí)，豬在1:50達(dá)“++”或“++"以上者，判為陽性反應(yīng)，在1: 25達(dá)“++”時(shí)為疑似反應(yīng)。大群檢疫時(shí)，為提高效率，可用玻板凝集反應(yīng)，豬血清在0.04mL處凝集，判為陽性反應(yīng)；在0.08mL處凝集時(shí)，判為疑似反應(yīng)。判為可疑的豬，3-4周后應(yīng)采血重檢，如仍為可疑反應(yīng)�？砂匆韵虑闆r來確定，即該群中既無本病的流行病情況發(fā)生，也無臨床病例出現(xiàn)，血檢也無陽性時(shí)，則可判為陰性反應(yīng)。2．虎紅平板凝集反應(yīng) 虎紅布魯氏菌有色抗原呈酸性，且具有緩沖作用，并能抑制引起非特異性反應(yīng)的IgM的活性和增強(qiáng)特異性IgG的活性，使反應(yīng)的敏感性提高，特異性優(yōu)于常規(guī)試管凝集反應(yīng)。檢驗(yàn)時(shí)，取被檢血清與虎紅抗原各0.03mL，滴加于平板上混勻，放置4 - 10min觀察結(jié)果二只要有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，即可判為陽性反應(yīng)。3．其他方法‘熒光抗體染色法、間接炭凝集反應(yīng)、間接紅細(xì)胞凝集反應(yīng)、協(xié)同凝集試驗(yàn)、特異性花結(jié)吸附染色、酶標(biāo)SPA染色、二巰基乙醇（2-ME)凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、細(xì)胞免疫檢查法、乳汁環(huán)狀反應(yīng)、熱凝集反應(yīng)、凝膠電泳法等均可用于布魯氏菌病的診斷。閻守敦等(1990)應(yīng)用凝膠電泳法來鑒別布氏桿菌的人工感染和疫苗接種。近年來，間接血凝試驗(yàn)、抗球蛋白(Coombs)試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、熒光抗體法、DNA探針以及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等新的方法逐漸被用于本病診斷或檢疫。
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