武漢大學(xué)微生物講義

實驗二十八 

[目的要求]

學(xué)習(xí)并掌握生長譜法測定微生物營養(yǎng)需要的基本原理和方法。

[實驗原理]

微生物的生長繁殖需要適宜的營養(yǎng)環(huán)境，碳源、氮源、無機鹽、微量元素、生長因子等都是微生物生長所必需，缺少其中一種，微生物便不能正常生長、繁殖。在實驗室條件下，人們常用人工配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)微生物。由于不同類型微生物利用不同營養(yǎng)物質(zhì)的能力不同，它們在點植有不同營養(yǎng)物質(zhì)的平板上的生長圖形就會有差別，具有不同的生長譜，故稱此法為生長譜法。該法可以定性、 定量地測定微生物對各種營養(yǎng)物質(zhì)的需求，在微生物育種、營養(yǎng)缺陷型鑒定以及飲食制品質(zhì)量檢測等諸多方面具有重要用途。

[教學(xué)內(nèi)容]

生長譜法測定微生物的營養(yǎng)要求

實驗二十九

[目的要求]

1.學(xué)習(xí)水樣的采取方法和水樣細菌總數(shù)測定的方法。

2.了解水源水的平板菌落計數(shù)的原則.

[實驗原理]

本實驗應(yīng)用平板菌落計數(shù)技術(shù)測定水中細菌總數(shù)。由于水中細菌種類繁多，它們對營養(yǎng)和其他生長條件的要求差別很大，不可能找到一種培養(yǎng)基在一種條件下，使水中所有的細菌均能生長繁殖，因此，以一定的培養(yǎng)基平板上生長出來的菌落，計算出來的水中細菌總數(shù)僅是一種近似值。目前一般是采用普通肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。

[教學(xué)內(nèi)容]

水體中細菌總數(shù)的測定

實驗三十

[目的要求]

1.了解牛乳的細菌學(xué)檢查方法和質(zhì)量判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2.學(xué)習(xí)牛乳的巴斯德消毒法

[實驗原理]

從健康母牛體內(nèi)剛擠出的牛奶，含有少量的正常起始微生物。但將牛奶裝入未消毒的器具和在分裝、運輸過程中，會被很多其他微生物甚至致病菌污染。而且牛乳含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì) (碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂肪、無機鹽和維生素等)，在其中的微生物會很快繁殖，因此，一 份牛乳樣品的細菌含量可反映母牛的健康狀況和牛乳生產(chǎn)與保藏的條件。

[教學(xué)內(nèi)容]

牛乳中細菌的檢查

微生物學(xué)課堂講授詳細提綱

　第一章 緒論��

一、武漢大學(xué)“微生物學(xué)” 課程的建設(shè)與發(fā)展

二、本學(xué)期的教學(xué)安排

三、微生物與我們

四、微生物的發(fā)現(xiàn)和微生物學(xué)的建立與發(fā)展

（一）微生物的發(fā)現(xiàn)��

（二）微生物學(xué)的奠基

     1.巴斯德

      2.柯赫

（三）微生物學(xué)發(fā)展過程中的重大事件��

（四）20世紀的微生物學(xué)��

（五）微生物學(xué)在生命科學(xué)發(fā)展中的重要地位

      1、微生物是生物學(xué)基本理論研究中的理想實驗對象

      2．對生命科學(xué)研究技術(shù)的貢獻��

      3．微生物與“人類基因組計劃”��

（五)我國微生物學(xué)的發(fā)展��

（六）21世紀微生物學(xué)展望��

五、微生物的類群及特點

思考題：

1. 用具體事例說明人類與微生物的關(guān)系，為什么說微生物既是人類的敵人，更是我們的朋友？
　
2. 為什么微生物能成為生命科學(xué)研究的“明星”?
　
3. 為什么說巴斯德和柯赫是微生物學(xué)的奠基人?
　
第二章 純培養(yǎng)和顯微技術(shù)

第一節(jié) 微生物的分離和純培養(yǎng)

一、無菌技術(shù)

1. 微生物培養(yǎng)的常用器具及其滅菌

2. 接種操作

二、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)

1. 稀釋倒平板法

2. 涂布平板法

3. 平板劃線法

4. 厭氧微生物的分離

三、用液體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)

四、單細胞（孢子）分離

五、選擇培養(yǎng)分離

1. 利用選擇平板進行直接分離

2. 富集培養(yǎng)

六、二元培養(yǎng)物

第二節(jié) 顯微鏡和顯微技術(shù)

一、顯微鏡的種類及原理

1. 普通光學(xué)顯微鏡

2. 暗視野顯微鏡

3. 相差顯微鏡

4.  熒光顯微鏡

5. 透射電子顯微鏡

6. 掃描電子顯微鏡

7. 掃描隧道顯微鏡

二，顯微觀察樣品的制備（略）

思考題：

1、為什么說Koch等建立的微生物純培養(yǎng)技術(shù)是微生物學(xué)建立與發(fā)展的基石？一般可用哪些方法獲得微生物的純培養(yǎng)？

2、微生物的最顯著特征就是個體微小，通常只能通過 顯微鏡進行觀察。試列舉在顯微觀察（光鏡和電鏡）中通過改變樣

   品的反差以改善觀察效果的技術(shù)及方法。

3、試利用表格形式對各類顯微鏡在原理、樣品制備和觀察方面的異、同進行概括、比較。
　

4、 試找到一篇使用微生物照片的文獻，分析該文為什么要使用微生物照片，采用的是何種顯微觀察技術(shù)？依你之見，   
    該文作者的這張照片還可以用哪些技術(shù)獲得？

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