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一種制備別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法

公開(公告)號 CN101144077A  
公開(公告)日 2008.03.19  
申請(專利)號 CN200710029673.X  
申請日期 2007.08.09  
專利名稱 一種制備別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法  
主分類號 C12N15/09(2006.01)I  
分類號 C12N15/09(2006.01)I;C07K14/405(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 夏 坤;佟順剛  
地址 510663廣東省廣州市科學(xué)城攬月路80號廣州科技創(chuàng)新基地D區(qū)416房  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 廣州市南鋒專利事務(wù)所有限公司  
代理人 劉 媖  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項 一種制備別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法,其特征在于它包括以下步驟: (1)將beta裂合酶基因或其同源基因克隆于表達載體中,得到beta裂合酶表達質(zhì)粒;將別藻藍蛋白類脫輔基蛋白基因或其同源基因克隆于第二個表達載體中,得到脫輔基蛋白表達質(zhì)粒;將藻藍膽素生物合成酶基因(ho1和pcyA)或其同源基因克隆于第三個表達載體中,得到藻藍膽素合成質(zhì)粒; (2)將beta裂合酶表達質(zhì);蛎撦o基蛋白表達質(zhì)粒或藻藍膽素生物合成酶質(zhì)粒依次轉(zhuǎn)入配套的宿主菌;當這些表達質(zhì)粒都轉(zhuǎn)入宿主菌后,得到相應(yīng)的工程菌,應(yīng)用此工程菌通過發(fā)酵工程能生產(chǎn)別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì);發(fā)酵后,按常規(guī)蛋白質(zhì)提純技術(shù),提純得到相應(yīng)的別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)。  
摘要 本發(fā)明公開了一種制備別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法,通過應(yīng)用藻膽蛋白beta裂合酶催化藻藍膽素與別藻藍蛋白類脫輔基蛋白共價結(jié)合,制備別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì);本發(fā)明的方法應(yīng)用生物過程生產(chǎn)別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì),是一種環(huán)境友好的生產(chǎn)方法;別藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)能應(yīng)用于食品、保健與醫(yī)藥功能材料領(lǐng)域,特別是應(yīng)用為生物和醫(yī)學(xué)分子檢測領(lǐng)域的熒光探針。  
國際公布  
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