朝鮮薊抗菌劑—朝鮮薊提取物的一種新用途及其生產方法
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公開(公告)號
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CN1657096A
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公開(公告)日
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2005.08.24
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申請(專利)號
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CN200410088799.0
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申請日期
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2004.11.04
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專利名稱
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朝鮮薊抗菌劑—朝鮮薊提取物的一種新用途及其生產方法
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主分類號
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A61K35/78
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分類號
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A61K35/78;A61P31/04
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心
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發(fā)明(設計)人
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張洪勛;朱顯峰
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地址
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100085北京市海淀區(qū)雙清路18號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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代理人
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國省代碼
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北京;11
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主權項
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一種朝鮮薊天然抗菌劑的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：步驟1.索氏提取稱取500g葉和花苞干粉原料分別置于3000mL75％乙醇溶液的索氏提取器中，于沸水浴中提取，至索氏提取器內的溶液近乎無色為止；步驟2.提取液蒸發(fā)濃縮提取后的約2500mL提取液，旋轉蒸發(fā)真空濃縮(40℃，0.08MPa)至約800mL濃縮液；步驟3.第一次萃取分離往濃縮后的約800mL溶液中加入400mL的氯仿液進行萃取，分層后，棄去下層的氯仿相，保留水相；步驟4.第二次萃取分離往上次萃取后的水相中加入400mL的乙酸乙酯液進行萃取，分層后，棄去上層的乙酸乙酯相，保留水相；步驟5.第三次萃取分離往第二次萃取后的水相中加入400mL的正丁醇液進行萃取，分層后，棄去下層的水相，保留正丁醇相；步驟6.濃縮各萃取液旋轉蒸發(fā)真空濃縮(40℃，0.08MPa)三種萃取液，得40mL各濃縮液，用移液管吸取20mL濃縮液于恒重培養(yǎng)皿，在干燥箱內100℃烘6小時，稱量，算出其凈重，得各種提取物干粉，再取部分干粉溶解在各溶劑中，配置成12.5，25，50mg/mL濃度的各溶液；步驟7.SephadexLH-20柱分離將萃取后的正丁醇濃縮液20mL置于SephadexLH-20的凝膠柱上，用70％的甲醇洗脫，自動部份收集器收集，得60個分離試管，分別進行硅膠板分離鑒定和抗菌活性測定，分為4個不同的組分；步驟8.硅膠柱進一步分離第一組分用硅膠柱分離，乙酸乙酯/甲醇/水(7∶1∶1)洗脫；第二組分用硅膠柱分離(乙酸乙酯/甲醇/水(8∶1∶0.2)洗脫)，再用SephadexLH-20柱分離(甲醇洗脫)，進一步純化需用制備柱分離；第三組分用硅膠柱分離，乙酸乙酯/甲醇/水(8∶1∶1)洗脫，進一步純化需用制備柱分離；第四組分用硅膠柱分離，乙酸乙酯/甲醇/水(8∶1∶1)洗脫，進一步純化需用制備柱分離；步驟9.制備柱分離將每一組分的分離液各自合并，濃縮5～10倍，0.45μm膜過濾后，進入HPLC9.4×250mmZorbaxODS制備柱分離。
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摘要
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本發(fā)明介紹了一種朝鮮薊提取物作為天然抗菌劑的新用途及其生產方法。它將朝鮮薊葉、花苞、莖干粉通過索氏提取得到的原提取液，分別進行氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到的正丁醇相進行反復SephadexLH-20柱層析和硅膠柱層析分離，得到四個不同組分，再分別進行高壓液相制備柱分離，得到8種不同的天然抗菌化合物。本發(fā)明的朝鮮薊各提取物及其各萃取分離成分對大部分測試菌株基本都有抑制作用，而其中以葉子提取物的抑制性最強和正丁醇萃取液的抑菌活性最強。提取物8種活性成分對被測菌株具有廣泛的抗菌活性，其最低抑菌濃度在50～200μg/mL之間。
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國際公布
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