公開(公告)號(hào) | CN1140633C |
公開(公告)日 | 2004.03.03 |
申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN00114063.9 |
申請(qǐng)日期 | 2000.02.03 |
專利名稱 | 一種缺失型人α珠蛋白基因的PCR檢測方法 |
主分類號(hào) | C12Q1/68 |
分類號(hào) | C12Q1/68 |
分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué) |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 徐湘民;肖維威;鐘雄霖;劉忠英 |
地址 | 510515 廣東省廣州市同和 |
頒證日 | 2004.03.03 |
國際申請(qǐng) | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州科粵專利代理有限責(zé)任公司 |
代理人 | 余炳和 |
國省代碼 | 廣東;44 |
主權(quán)項(xiàng) | 一種缺失型人α珠蛋白基因的PCR檢測方法,包括對(duì)人基因DNA待測樣品的PCR擴(kuò)增和對(duì)經(jīng)PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析,其特征在于采用4個(gè)引物P1、P2、P7、P4組成2對(duì)PCR反應(yīng),該P(yáng)CR體系的引物設(shè)計(jì)方案為:(1)引物P1和P2組成一對(duì)擴(kuò)增-SEA/基因的引物,這2個(gè)引物分別位于該缺失基因5’斷裂點(diǎn)的上游和3’斷裂點(diǎn)的下游;引物P7、P4組成一對(duì)擴(kuò)增正常等位基因的引物,這2個(gè)引物的結(jié)合點(diǎn)均位于中國人常見的α地貧基因缺失區(qū)內(nèi),即引物所在區(qū)域是--SEA/、-α3.7/和-α4.2/這三種基因的共同缺失點(diǎn);(2)在每條引物的特異性基因序列的5’端連上一段由20個(gè)核苷酸組成的與人類基因不同源的高GC含量的序列,該20個(gè)核苷酸長度的寡核苷酸與特異性引物序列直接連接,其合成方式與普通引物相同,這樣,構(gòu)成此2重PCR體系的4個(gè)這種加長的寡核苷酸引物的5’端均含有一個(gè)共同尾序列。 |
摘要 | 本發(fā)明提供一種缺失型人α珠蛋白基因的PCR檢測方法,本發(fā)明采用4個(gè)(2對(duì))引物P1、P2、P7、P4組成2對(duì)PCR反應(yīng),分別針對(duì)正常等位基因和缺失等位基因(-SEA/基因),提供了引物的設(shè)計(jì)方案和結(jié)果的解釋。根據(jù)本發(fā)明的新方案所建立的檢測-SEA缺失基因的方法,經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)可在同一試管內(nèi)同時(shí)實(shí)現(xiàn)2對(duì)特異性PCR引物的擴(kuò)增,且有很好的重復(fù)性。本方法除提供-SEA缺失基因檢測信息外,還能一次檢測提供多種有價(jià)值的特定α珠蛋白基因缺失的信息。 |
國際公布 |