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一種快速定量檢測(cè)豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒及應(yīng)用

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1164767C  
公開(kāi)(公告)日 2004.09.01  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02139253.6  
申請(qǐng)日期 2002.11.08  
專利名稱 一種快速定量檢測(cè)豬瘟病毒和豬瘟化弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒及應(yīng)用  
主分類號(hào) C12Q1/68  
分類號(hào) C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 武漢大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 張楚瑜;潘茲書(shū);陳玉棟  
地址 430072 湖北省武漢市武昌珞珈山  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 武漢科宏專利事務(wù)所  
代理人 王敏鋒  
國(guó)省代碼 湖北;42  
主權(quán)項(xiàng) 一種快速定量檢測(cè)豬瘟病毒和豬瘟弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒,該試劑盒包括a)RNA裂解液,b)逆轉(zhuǎn)錄酶,c)RNA酶抑制劑,d)Taq DNA聚合酶,e)標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性模板,f)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液和g)熒光定量反應(yīng)液,其特征是:逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液含有反向引物,其序列為5′-ATCAGGTCGTACTCCCATCAC-3′,熒光定量反應(yīng)液含有引物和熒光探針,引物為正向引物和反向引物,其序列分別為5′-TAGCCATGCCCATAGTAGG-3′和5′-ATCAGGTCGTACTCCCATCAC-3′,熒光探針序列為5′-TACAGGACAGTCGTCAGTAGTTCGACGTGA-3′,熒光探針5′端標(biāo)記的熒光報(bào)告基團(tuán)是FAM,3′端標(biāo)記的熒光受體基團(tuán)為ROX,標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性模板pGS是含有豬瘟兔化弱毒株5′端400個(gè)核苷酸片段插入pGEM-T載體構(gòu)成的,且該載體可在大腸桿菌DH5α中增殖。  
摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種快速定量檢測(cè)豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒,利用該試劑盒快速定量檢測(cè)豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗的方法以及該試劑盒在快速定量檢測(cè)豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗中的應(yīng)用。該試劑盒及方法克服了傳統(tǒng)和現(xiàn)代方法中存在的不足,可有效方便地對(duì)豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗進(jìn)行定量檢測(cè)以及對(duì)豬瘟兔化弱毒疫苗生產(chǎn)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。  
國(guó)際公布  
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