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SARS病毒S蛋白與N蛋白的融合蛋白及其制備、應(yīng)用

公開(公告)號(hào) CN1488646A  
公開(公告)日 2004.04.14  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03132162.3  
申請(qǐng)日期 2003.07.03  
專利名稱 SARS病毒S蛋白與N蛋白的融合蛋白及其制備、應(yīng)用  
主分類號(hào) C07K19/00  
分類號(hào) C07K19/00;C07K16/08;C12N15/62;C12N15/63;G01N33/68;A61K39/215;A61P31/14;A61P11/00  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 李越希  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李越希;陶開華;朱敏生  
地址 210002江蘇省南京市玄武區(qū)中山東路293號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京君陶專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 奚勝元  
國(guó)省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種SARS病毒S蛋白片段和N蛋白片段的融合蛋白,即SARS病毒的S蛋白的第162個(gè)基酸至第460個(gè)氨基酸片段和SARS病毒的N蛋白的第1個(gè)氨基酸至258氨基酸片段的融合蛋白,N蛋白片段在融合蛋白的N端,S蛋白片段在融合蛋白的C端,兩蛋白片段之間用甘氨酸和絲氨酸連接,在N蛋白片段的第一個(gè)氨基酸蛋氨酸后插入一個(gè)甘氨酸,融合蛋白全長(zhǎng)560個(gè)氨基酸,氨基酸序列如下:Met Gly Ser Asp Asn Gly Pro Gln Ser Asn Gln Arg Ser Ala Pro Arg1 5 10 15Ile Thr Phe Gly Gly Pro Thr Asp Ser Thr Asp Asn Asn Gln Asn Gly20 25 30Gly Arg Asn Gly Ala Arg Pro Lys Gln Arg Arg Pro Gln Gly Leu Pro35 40 45Asn Asn Thr Ala Ser Trp Phe Thr Ala Leu Thr Gln His Gly Lys Glu50 55 60Glu Leu Arg Phe Pro Arg Gly Gln Gly Val Pro Ile Asn Thr Asn Ser65 70 75 80Gly Pro Asp Asp Gln Ile Gly Tyr Tyr Arg Arg Ala Thr Arg Arg Val85 90 95Arg Gly Gly Asp Gly Lys Met Lys Glu Leu Ser Pro Arg Trp Tyr Phe100 105 110Tyr Tyr Leu Gly Thr Gly Pro Glu Ala Ser Leu Pro Tyr Gly Ala Asn115 120 125Lys Glu Gly Ile Val Trp Val Ala Thr Glu Gly Ala Leu Asn Thr Pro130 135 140Lys Asp His Ile Gly Thr Arg Asn Pro Asn Asn Asn Ala Ala Thr Val145 150 155 160Leu Gln Leu Pro Gln Gly Thr Thr Leu Pro Lys Gly Phe Tyr Ala Glu165 170 175Gly Ser Arg Gly Gly Ser Gln Ala Ser Ser Arg Ser Ser Ser Arg Ser180 185 190Arg Gly Asn Ser Arg Asn Ser Thr Pro Gly Ser Ser Arg Gly Asn Ser195 200 205Pro Ala Arg Met Ala Ser Gly Gly Gly Glu Thr Ala Leu Ala Leu Leu210 215 220Leu Leu Asp Arg Leu Asn Gln Leu Glu Ser Lys Val Ser Gly Lys Gly225 230 235 240Gln Gln Gln Gln Gly Gln Thr Val Thr Lys Lys Ser Ala Ala Glu Ala245 250 255Ser Lys Lys Gly Ser Glu Tyr Ile Ser Asp Ala Phe Ser Leu Asp Val260 265 270Ser Glu Lys Ser Gly Asn Phe Lys His Leu Arg Glu Phe Val Phe Lys275 280 285Asn Lys Asp Gly Phe Leu Tyr Val Tyr Lys Gly Tyr Gln Pro Ile Asp290 295 300Val Val Arg Asp Leu Pro Ser Gly Phe Asn Thr Leu Lys Pro Ile Phe305 310 315 320Lys Leu Pro Leu Gly Ile Asn Ile Thr Asn Phe Arg Ala Ile Leu Thr325 330 335Ala Phe Ser Pro Ala Gln Asp Thr Trp Gly Thr Ser Ala Ala Ala Tyr340 345 350Phe Val Gly Tyr Leu Lys Pro Thr Thr Phe Met Leu Lys Tyr Asp Glu3  
摘要 本發(fā)明SARS病毒S蛋白與N蛋白的融合蛋白及其制備、應(yīng)用涉及基因工程技術(shù)、疫苗和診斷試劑領(lǐng)域。通過計(jì)算機(jī)分析SARS病毒S蛋白和N蛋白的氨基酸序列,篩選出含強(qiáng)抗原表位的SARS病毒的S蛋白片段,即第162個(gè)氨基酸至第460個(gè)氨基酸,共299個(gè)氨基酸,和含強(qiáng)抗原表位的SARS病毒的N蛋白片段,即第1個(gè)氨基酸至258氨基酸。選擇真核和原核生物均偏愛的密碼子,化學(xué)合成全新的SARS病毒S蛋白片段和N蛋白片段的基因序列,將兩個(gè)基因片段串聯(lián),利用基因工程技術(shù)表達(dá)S蛋白片段和N蛋白片段的融合蛋白,兩蛋白片段之間用甘氨酸和絲氨酸連接,在N蛋白片段的第一個(gè)氨基酸蛋氨酸后插入一個(gè)甘氨酸,融合蛋白全長(zhǎng)560個(gè)氨基酸。表達(dá)的融合蛋白可用于疫苗及SARS病毒抗體或抗原的檢測(cè),及用于免疫制備抗SARS病毒單抗和多抗等。  
國(guó)際公布  
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