公開(公告)號
|
CN1155714C
|
公開(公告)日
|
2004.06.30
|
申請(專利)號
|
CN97198755.6
|
申請日期
|
1997.09.04
|
專利名稱
|
抗真菌蛋白及其編碼DNA和摻入此DNA的宿主
|
主分類號
|
C12N15/82
|
分類號
|
C12N15/82;C12N9/02;C12Q1/68;C07K16/40;C12N15/62;A01H5/00
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
1996.9.4 EP 96202466.7; 1997.3.19 EP 97200831.2
|
申請(專利權(quán))人
|
辛根塔默根有限公司
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
M·H·斯圖威
|
地址
|
荷蘭萊頓
|
頒證日
|
2004.06.30
|
國際申請
|
PCT/EP1997/004923 1997.9.4
|
進(jìn)入國家日期
|
1999.04.13
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
|
代理人
|
周中琦
|
國省代碼
|
荷蘭;NL
|
主權(quán)項(xiàng)
|
獲得對選自疫霉屬和/或腐霉屬的真菌的易感性降低的植物的方法,所述方法包含以下步驟:(a)將嵌合DNA序列導(dǎo)入易于再生出完整植株的祖細(xì)胞,所述嵌合DNA序列包含能編碼選自SEQ ID NO:15,19,57,70,72和74描述的蛋白質(zhì)或其突變蛋白的開放閱讀框架,該突變蛋白通過替換、添加或缺失一個氨基酸而與所述蛋白質(zhì)不同,其中該突變蛋白具有抗疫霉屬和/或抗腐霉屬活性,所述的開放閱讀框架可操作性地與轉(zhuǎn)錄和翻譯起始區(qū)以及轉(zhuǎn)錄終止區(qū)連接,以使在對所述的真菌侵染易感的所述祖細(xì)胞中產(chǎn)生所述蛋白或突變蛋白,以及(b)所述嵌合DNA序列編碼植物選擇性標(biāo)記,以選擇所述選擇性標(biāo)記存在其中的轉(zhuǎn)化祖細(xì)胞,以及,(c)在有利于具有所述的選擇性標(biāo)記的祖細(xì)胞的條件下使所述祖細(xì)胞再生為植株,以及,(d)鑒定產(chǎn)生所述蛋白質(zhì)或所述突變蛋白的植物,由此降低所述植物對所述疫霉屬和/或腐霉屬侵染的易感性。
|
摘要
|
本發(fā)明提供可從植物來源獲得的具有抗真菌活性,特別是抗疫霉和/或抗腐霉活性并且通過SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測定分子量為約55-65千道爾頓的分離的蛋白;以及包含能編碼根據(jù)本發(fā)明所述的蛋白的開放閱讀框架的分離DNA序列,優(yōu)選地特征在于所含的開放閱讀框架能編碼在SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:57,SEQ ID NO:70,SEQ IDNO:72或SEQ ID NO:74中所示的蛋白或其突變蛋白。本發(fā)明進(jìn)一步包括摻入了能編碼根據(jù)本發(fā)明所述的蛋白的嵌合DNA并且蛋白在其中表達(dá)的植物。本發(fā)明也證明了所述蛋白的碳水化合物氧化酶和優(yōu)選地己糖氧化酶活性。本發(fā)明也提供使用該蛋白或能合成該蛋白的宿主細(xì)胞來抵抗真菌,尤其是疫霉和腐霉屬種類的方法。
|
國際公布
|
WO1998/013478 英 1998.4.2
|