| 公開(公告)號 | CN1160471C |
| 公開(公告)日 | 2004.08.04 |
| 申請(專利)號 | CN98804409.9 |
| 申請日期 | 1998.04.21 |
| 專利名稱 | 檢測致病性大腸桿菌菌株的TaqManTM-PCR |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1997.4.22 DK 0451/1997 |
| 申請(專利權(quán))人 | 巴法理安諾迪克研究協(xié)會有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 克勞斯·費(fèi)弗 |
| 地址 | 丹麥格洛斯楚普 |
| 頒證日 | 2004.08.04 |
| 國際申請 | PCT/EP1998/002341 1998.4.21 |
| 進(jìn)入國家日期 | 1999.10.22 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京市柳沈律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 巫肖南 |
| 國省代碼 | 丹麥;DK |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種檢測樣品中致病性腸細(xì)菌的方法，包括使用一組寡核苷酸引物對、具有5’-3’外切核酸酶活性的聚合酶、以及帶有標(biāo)記的寡核苷酸探針，針對從所述樣品中分離的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，所述引物對允許通過擴(kuò)增每組致病性大腸桿菌菌株特有的毒性因子/毒素基因而區(qū)分至少兩組致病性大腸桿菌菌株，其中該組核苷酸引物對包括兩個(gè)或多個(gè)選自下組的引物對：與編碼熱不穩(wěn)定毒素，或熱穩(wěn)定毒素的基因雜交的用于腸產(chǎn)毒性大腸桿菌特有的DNA序列擴(kuò)增的引物對；與編碼熱穩(wěn)定毒素的基因雜交的用于腸聚集性大腸桿菌特有的DNA序列擴(kuò)增的引物對；與pCVD432質(zhì)粒雜交的用于腸聚集性大腸桿菌特有的DNA序列擴(kuò)增的引物對；與inv質(zhì)粒雜交的用于腸侵染性大腸桿菌特有的DNA序列擴(kuò)增的引物對；與EAF質(zhì)粒或eae基因雜交的用于腸致病性大腸桿菌特有的DNA序列擴(kuò)增的引物對；與編碼志賀氏樣毒素sltI或sltII的基因雜交的用于腸出血性大腸桿菌特有的DNA序列擴(kuò)增的引物對，所述帶有標(biāo)記的寡核苷酸，在最靠5’端的堿基處被熒光染料標(biāo)記，在最靠3’端的堿基處被熒光猝滅染料標(biāo)記，它在靶DNA內(nèi)部雜交，所述帶有標(biāo)記的寡核苷酸探針，對所述聚合酶的5’-3’外切核酸酶降解作用敏感，被降解后產(chǎn)生通過熒光檢測法可檢測到的片段。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種檢測樣品中致病性大腸桿菌的方法，包括使用致病性大腸桿菌特異性的寡核苷酸引物將從所述樣品中分離出的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。 |
| 國際公布 | WO1998/048046 英 1998.10.29 |
