| 公開(公告)號 | CN1173038C |
| 公開(公告)日 | 2004.10.27 |
| 申請(專利)號 | CN03112934.X |
| 申請日期 | 2003.03.10 |
| 專利名稱 | 重組人二連體干細(xì)胞因子及其制備 |
| 主分類號 | C12N15/62 |
| 分類號 | C12N15/62;C12N15/85;C07H21/04;C12P21/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 南京大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 秦浚川;韓俊海;臧宇輝;朱潔 |
| 地址 | 210093 江蘇省南京市漢口路22號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 南京知識律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 胡錫瑜 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項 | 一種重組人二連體干細(xì)胞因子融合蛋白基因，其特征是設(shè)計并構(gòu)建一個含可溶性人干細(xì)胞因子1-165位氨基酸的編碼區(qū)，12個氨基酸GGGGSGGGGSGG柔性連接肽編碼區(qū)與另一個可溶性人干細(xì)胞因子1-145位氨基酸的編碼區(qū)及終止密碼依次頭尾共價連接的DNA片段，重組人二連體干細(xì)胞因子融合蛋白基因的核苷酸序列為：gaagggatct gcaggaatcg tgtgactaat aatgtaaaag acgtcactaa attggtggca 60aatcttccaa aagactacat gataaccctc aaatatgtcc ccgggatgga tgttttgcca 120agtcattgtt ggataagcga gatggtagta caattgtcag acagcttgac tgatcttctg 180gacaagtttt caaatatttc tgaaggcttg agtaattatt ccatcataga caaacttgtg 240aatatagtgg atgaccttgt ggagtgcgtg aaagaaaact catctaagga tctaaaaaaa 300tcattcaaga gcccagaacc caggctcttt actcctgaag aattctttag aatttttaat 360agatccattg atgccttcaa ggactttgta gtggcatctg aaactagtga ttgtgtggtt 420tcttcaacat taagtcctga gaaagattcc agagtcagtg tcacaaaacc atttatgtta 480ccccctgttg cagccggagg aggaggatcc ggaggaggag gctccggcgg cgaagggatc 540tgcaggaatc gtgtgactaa taatgtaaaa gacgtcacta aattggtggc aaatcttcca 600aaagactaca tgataaccct caaatatgtc cccgggatgg atgttttgcc aagtcattgt 660tggataagcg agatggtagt acaattgtca gacagcttga ctgatcttct ggacaagttt 720tcaaatattt ctgaaggctt gagtaattat tccatcatag acaaacttgt gaatatagtg 780gatgaccttg tggagtgcgt gaaagaaaac tcatctaagg atctaaaaaa atcattcaag 840agcccagaac ccaggctctt tactcctgaa gaattcttta gaatttttaa tagatccatt 900gatgccttca aggactttgt agtggcatct gaaactagtg attgtgtggt ttcttcaaca 960ttaagttagt aa相應(yīng)的氨基酸序列為：Glu Gly Ile Cys Arg Asn Arg Val Thr Asn Asn Val Lys Asp Val Thr Lys Leu Val Ala5 10 15 20Asn Leu Pro Lys Asp Tyr Met Ile Thr Leu Lys Tyr Val Pro Gly Met Asp Val Leu Pro25 30 35 40Ser His Cys Trp Ile Ser Glu Met Val Val Gln Leu Ser Asp Ser Leu Thr Asp Leu Leu45 50 55 60Asp Lys Phe Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Val65 70 75 80Asn Ile Val Asp Asp Leu Val Glu Cys Val Lys Glu Asn Ser Ser Lys Asp Leu Lys Lys85 90 95 100Ser Phe Lys Ser Pro Glu Pro Arg Leu Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Arg Ile Phe Asn105 110 115 120Arg Ser Ile Asp Ala Phe Lys Asp Phe Val Val Ala Ser Glu Thr Ser Asp Cys Val Val125 130 135 140Ser Ser Thr Leu Ser Pro Glu Lys Asp Scr Arg Val Ser Val Thr Lys Pro Phe Met Leu145 150 155 160Pro Pro Val Ala AlaGlu Gly Ile165 170 175 180Cys Arg Asn Arg Val Thr Asn Asn Val Lys Asp Val Thr Lys Leu Val Ala Asn Leu Pro185 190 195 200Lys Asp Tyr Met Ile Thr Leu Lys Tyr Val Pro Gly Met Asp Val Leu Pro Ser His Cys205 210 215 220Trp Ile Ser Glu Met Val Val Gln Leu Ser Asp Ser Leu Thr Asp Leu Leu Asp Lys Phe225 230 235 240Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Val Asn Ile Val245 250 255 260Asp Asp Leu Val Glu Cys Val Lys Glu Asn Ser Ser Lys Asp Leu Lys Lys Ser Phe Lys265 270 275 280Ser Pro Glu Pro Arg Leu Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Arg Ile Phe Asn Arg Ser Ile285 290 295 300Asp Ala Phe Lys Asp Phe Val Val Ala Ser Glu Thr Ser Asp Cys Val Val Ser Ser Thr305 310 315 320Leu Ser |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于生物技術(shù)中的基因工程制備多肽藥物技術(shù)領(lǐng)域。其目的是構(gòu)建一種新型融合型二連體干細(xì)胞因子基因，并在昆蟲細(xì)胞中高效分泌表達(dá)和制備生物活性更高副作用更小的重組人二連體干細(xì)胞因子(rhdSCF)。rhdSCF基因為依次含有人SCF第1-165位氨基酸密碼子，12個氨基酸連接肽和人SCF第1-145位密碼子及終止密碼的DNA片段。從Sf9細(xì)胞貼壁或懸浮培養(yǎng)液中制備的rhdSCF精品比活為2.8-2.9×106單位/毫克。比E.coli生產(chǎn)的單體rhSCF精品比活高約6倍。它可用于放療、化療及骨髓移植后病人促進(jìn)造血功能和免疫功能的重建和恢復(fù)，也可用于干細(xì)胞的體外擴(kuò)增研究。 |
| 國際公布 |
