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在芽孢桿菌屬細胞中生產(chǎn)多肽的方法

公開(公告)號 CN1174101C  
公開(公告)日 2004.11.03  
申請(專利)號 CN99803331.6  
申請日期 1999.02.26  
專利名稱 在芽孢桿菌屬細胞中生產(chǎn)多肽的方法  
主分類號 C12N15/75  
分類號 C12N15/75;C12N15/52;C12N15/57;C12N9/54;C12N1/21;//C07K14/325(C12N1/21,C12R1:07)  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1998.2.26 US 09/031,442  
申請(專利權(quán))人 諾沃奇梅茲生物技術(shù)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 W·威德內(nèi);A·斯羅馬;M·D·托馬斯  
地址 美國加利福尼亞  
頒證日  
國際申請 PCT/US1999/004360 1999.2.26  
進入國家日期 2000.08.25  
專利代理機構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所  
代理人 陳文平  
國省代碼 美國;US  
主權(quán)項 制備多肽的方法,其包括:(a)將芽孢桿菌屬(Bacillus)細胞培養(yǎng)于有利于生產(chǎn)多肽的培養(yǎng)基中,其中該芽孢桿菌屬細胞含有一具有串聯(lián)啟動子的核酸構(gòu)建體,所述串聯(lián)啟動子中的每個啟動子序列均可操作地與單拷貝編碼該多肽的核酸序列連接,該串聯(lián)啟動子的兩個或多個啟動子序列同時促進該核酸序列的轉(zhuǎn)錄,并且使用串聯(lián)啟動子時所產(chǎn)生的多肽的量比單獨使用串聯(lián)啟動子的各啟動子序列時要更高;和(b)從培養(yǎng)基中分離該多肽。  
摘要 本發(fā)明涉及生產(chǎn)多肽的方法,其包括:(a)將芽孢桿菌屬(Bacillus)宿主細胞培養(yǎng)于有利于生產(chǎn)多肽的培養(yǎng)基中,其中該芽孢桿菌屬細胞含有一種核酸構(gòu)建體,該核酸構(gòu)建體具有(i)一個串聯(lián)啟動子,其中該串聯(lián)啟動子的每個啟動子序列均與一單拷貝多肽編碼核酸序列可操作地連接,或還含有(ii)一個位于該串聯(lián)啟動子下游和該多肽編碼核酸序列上游的mRNA加工/穩(wěn)定序列;和(b)從培養(yǎng)基中分離多肽。本發(fā)明還涉及一種生產(chǎn)多肽的方法,其包括:(a)將芽孢桿菌屬宿主細胞培養(yǎng)于有利于生產(chǎn)多肽的培養(yǎng)基中,其中該芽孢桿菌屬細胞含有一種核酸構(gòu)建體,該核酸構(gòu)建體具有(i)一個包含“-35”區(qū)TTGACA序列和“-10”區(qū)TATAAT序列的“共有序列”啟動子,該串聯(lián)啟動子可操作地連接一個單拷貝編碼多肽的核酸序列,以及(ii)一個位于該“共有序列”啟動子下游和該多肽編碼核酸序列上游的mRNA加工/穩(wěn)定序列;和(b)從培養(yǎng)基中分離多肽。  
國際公布 WO1999/043835 英 1999.9.2  
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