| 公開(公告)號 | CN1533436A |
| 公開(公告)日 | 2004.09.29 |
| 申請(專利)號 | CN03800140.3 |
| 申請日期 | 2003.01.14 |
| 專利名稱 | 通過同源重組用于基因斷裂的選擇細(xì)胞的快速方法 |
| 主分類號 | C12N15/11 |
| 分類號 | C12N15/11;C12N15/90 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2002.1.14 US 60/348,549 |
| 申請(專利權(quán))人 | 基因組生物科學(xué)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | R·M·小伯吉斯;P·A·施奈德 |
| 地址 | 美國加利福尼亞州 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | PCT/US2003/001260 2003.1.14 |
| 進(jìn)入國家日期 | 2003.10.10 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 趙蓉民 |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種鑒定轉(zhuǎn)化細(xì)胞的方法，該轉(zhuǎn)化細(xì)胞經(jīng)過利用AMFP載體進(jìn)行了位點(diǎn)特異性同源重組，所述的方法包含：a)設(shè)計用AMFP載體轉(zhuǎn)化的細(xì)胞以進(jìn)行位點(diǎn)特異的同源/重組，其中所述的載體包括：實(shí)質(zhì)上與宿主基因組的內(nèi)源基因組序列同源的第一DNA序列；第二DNA序列，該序列編碼在所述細(xì)胞中編碼特征性缺乏調(diào)節(jié)因子和編碼初始蛋氨酸的序列的熒光蛋白選擇，并且與細(xì)胞內(nèi)源性基因組序列非同源，因此不能進(jìn)行位點(diǎn)特異性同源重組。實(shí)質(zhì)上與宿主基因組的內(nèi)源基因組序列同源，并且與第一DNA序列不同的第三DNA序列；b)通過選擇存在所述第二DNA序列的功能性熒光蛋白可選擇標(biāo)記的基因產(chǎn)物，繁殖細(xì)胞以選擇或富集那些用所述AMFP載體轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。c)從沒有所述第二DNA序列的細(xì)胞中分離具有所述編碼功能性熒光蛋白可選擇標(biāo)記的第二DNA序列的細(xì)胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了用于真核細(xì)胞特別基因組位點(diǎn)的特異性改變的方法和載體。一種方法包含利用負(fù)-ATG(ATG-minus)熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)基因靶向(AMFP)DNA載體，目的是為了產(chǎn)生和鑒別經(jīng)過位點(diǎn)特異性同源重組把載體序列整合進(jìn)宿主細(xì)胞基因組的細(xì)胞。該方法也包含利用編碼體內(nèi)可發(fā)現(xiàn)標(biāo)記的序列，鑒別經(jīng)過位點(diǎn)特異性同源重組或是非同源重組或是插入而把外源載體序列整合進(jìn)了宿主細(xì)胞的基因組的細(xì)胞。本發(fā)明也包括在真核細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生修飾的載體。另外，本發(fā)明包括通過實(shí)施和使用提供的方法和載體，從具備特異性遺傳改變的細(xì)胞生成的細(xì)胞和有機(jī)體。 |
| 國際公布 | WO2003/060087 英 2003.7.24 |
