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發(fā)酵生產(chǎn)門冬酰胺酶的方法

公開(公告)號 CN1189561C  
公開(公告)日 2005.02.16  
申請(專利)號 CN02134572.4  
申請日期 2002.08.19  
專利名稱 發(fā)酵生產(chǎn)門冬酰胺酶的方法  
主分類號 C12N9/82  
分類號 C12N9/82;C12N1/20  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 廣州市微生物研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 梁淑娃;彭中健;楊冠東;杜少平  
地址 510250 廣東省廣州市寶崗大道荔福路68號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專利代理有限公司  
代理人 何燕玲  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種發(fā)酵生產(chǎn)門冬酰胺酶的方法,包括平板培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng),其特征在于:(1)平板培養(yǎng):將凍干的大腸桿菌菌種用水溶解后,涂布至凝固有培養(yǎng)基的平皿上于36-40℃培養(yǎng)10-36小時(shí);(2)種子罐培養(yǎng):將(1)中已長好的平皿菌種接入種子罐中,在36-40℃,轉(zhuǎn)速250-500轉(zhuǎn)/分,風(fēng)量1∶0.3-1∶1.2體積/體積/分的條件下,培養(yǎng)10-16小時(shí);(3)發(fā)酵罐培養(yǎng):將(2)中已培養(yǎng)好的種子罐菌種接入發(fā)酵罐中,接種量為10-30%,在36-40℃,轉(zhuǎn)速180-350轉(zhuǎn)/分,風(fēng)量1∶0.3-1∶1.2體積/體積/分,pH6.5-7.5的條件下,培養(yǎng)10-16小時(shí);其中平板培養(yǎng)所用培養(yǎng)基的組分及重量百分含量為:牛肉膏2-6%、NaCl0.1-2%、瓊脂0.5-2.5%,pH6.5-7.5;其中種子罐和發(fā)酵罐培養(yǎng)所用的液體培養(yǎng)基的組分及重量百分含量為:牛肉膏2-6%、玉米漿0.5-4%、酵母粉0.5-2.5%、味精1-3%,pH6.5-7.5。  
摘要 本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域,提供了一種發(fā)酵生產(chǎn)門冬酰胺酶的方法。以大腸桿菌為出發(fā)菌進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn),在適合的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,能使門冬酰胺酶獲得高效表達(dá),產(chǎn)酶單位為50-80單位/毫升。使用本發(fā)明的方法生產(chǎn)門冬酰胺酶針劑,原材料成本大大降低。  
國際公布  
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