| 公開(公告)號 | CN1194086C |
| 公開(公告)日 | 2005.03.23 |
| 申請(專利)號 | CN02100859.0 |
| 申請日期 | 2002.02.01 |
| 專利名稱 | 一種神經干細胞制劑的制備方法 |
| 主分類號 | C12N5/08 |
| 分類號 | C12N5/08;A61K35/54;A61K35/30;A61P43/00;A61P25/00;A61P21/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 北京科宇聯(lián)合干細胞生物技術有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 沈麗;李凌松;張浣清;李肖霞 |
| 地址 | 100083 北京市學院路38號北京大學醫(yī)學部會議中心一層北翼 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 北京元中知識產權代理有限責任公司 |
| 代理人 | 王明霞;母宗緒 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權項 | 一種神經干細胞制劑的制備方法，其特征在于人死亡胚胎腦組織用消化液消化后加入培養(yǎng)基中止消化，離心后加入培養(yǎng)基機械吹打為單細胞懸液，在CO2、37℃下經過體外培養(yǎng)，篩選出神經干細胞球，得到神經干細胞，在體外傳3-6代，并在傳代過程中純化神經干細胞，得到神經干細胞制劑；所述的消化液為0.25％胰蛋白酶或0.25％胰蛋白酶和0.01％EDTA；所述的中止消化的培養(yǎng)基為DMEM/F12和10-20V％胎牛血清；所述的體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基為下述組合物：(1)N2添加劑，0-1mlN2/100ml培養(yǎng)基或B27添加劑，0-1mlB27/100ml培養(yǎng)基DMEM/F128-20mg/ml(2)堿性成纖維細胞生長因子bFGF10-20ng/ml(3)表皮生長因子EGF10-20ng/ml(4)轉鐵蛋白transferring0.05-0.5mg/ml(5)硒酸鈉2-10ng/ml(6)腐胺5-10μg/ml(7)胰島素0.01-0.05mg/ml(8)L-谷氨酸胺0.1-0.5mg/ml(9)孕酮5.0-10ng/ml(10)抗生素：慶大霉素800-1300U/ml。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種神經干細胞制劑及其制備方法，是采用人胚胎腦組織用消化液消化后加入培養(yǎng)基中止消化，離心后機械吹打為單細胞懸液，加入培養(yǎng)基，在CO2、37℃下經過體外培養(yǎng)，篩選出神經干細胞球，即得到神經干細胞。中分離培養(yǎng)的神經干細胞，在體外傳3-6代，并在傳代過程中純化神經干細胞，得到的神經干細胞制劑。所述神經干細胞制劑植入動物體內，不用免疫抑制劑或在少量免疫抑制劑的輔助治療下，神經干細胞可以在自體生理微環(huán)境下分化形成一種類似于schwann細胞樣的細胞，使髓鞘再生，脊髓功能獲得重建，可以用于治療人類脊髓疾病，特別是運動神經元病。 |
| 國際公布 |
