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嗜水氣單胞菌中溶血素的免疫刺激復(fù)合物的制備工藝

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1292794C  
公開(kāi)(公告)日 2007.01.03  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03152830.9  
申請(qǐng)日期 2003.08.22  
專利名稱 嗜水氣單胞菌中溶血素的免疫刺激復(fù)合物的制備工藝  
主分類號(hào) A61K39/02(2006.01)I  
分類號(hào) A61K39/02(2006.01)I;A61K39/39(2006.01)I;C12P21/00(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所;方勤美;龔 暉;林天龍  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 方勤美;龔 暉;林天龍  
地址 350003福建省福州市五四北路247號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 福州展暉專利事務(wù)所  
代理人 林天凱  
國(guó)省代碼 福建;35  
主權(quán)項(xiàng) 嗜水氣單胞菌中溶血素的免疫刺激復(fù)合物的制備工藝,其特征在于,具有如下步驟:(1)提供一種嗜水氣單胞菌菌株,(2)在培養(yǎng)基中對(duì)該菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)而得培養(yǎng)液,(3)從培養(yǎng)液中提取毒素,①提供一種離心機(jī),②在離心機(jī)中對(duì)培養(yǎng)液離心后得上清液,③用飽和硫酸銨處理上清液于離心機(jī)中離心后取沉淀,④將沉淀溶用PBS重懸,并透析,獲取懸液即為毒素,(4)依如下順序制備免疫刺激復(fù)合物,①將毒素濃縮至1~3mg/ml后第一次加有機(jī)酸處理1~3h,②加入Mega-10至終濃度為2%,在37℃下處理4h,③加入Quil A佐劑至終濃度為0.05~0.2%,④加入膽固醇、卵磷脂至終濃度為125μg/mL而得組合物,(5)第二次加有機(jī)酸處理組合物后透析4h,再用0.01M PBS透析72h,獲取懸液即為免疫刺激復(fù)合物。  
摘要 本發(fā)明涉及分子生物學(xué)和免疫學(xué)領(lǐng)域,特別涉及一種嗜水氣單胞菌中溶血素的免疫刺激復(fù)合物的制備工藝,步驟為:將嗜水氣單胞菌菌株培養(yǎng)而得培養(yǎng)液;培養(yǎng)液離心后得上清液,用飽和硫酸銨處理上清液,離心后取沉淀用PBS重懸、透析,獲取懸液即為毒素;將毒素濃縮至1~3mg/ml后加入有機(jī)酸處理1~3h,加入Mega-10至終濃度2%,37℃處理4h,加入QuilA佐劑至終濃度0.05~0.2%,加入膽固醇、卵磷脂至終濃度125μg/mL,用有機(jī)酸處理后透析4h,獲取懸液即為免疫刺激復(fù)合物。該免疫刺激復(fù)合物的免疫效果穩(wěn)定,增效顯著,可產(chǎn)生強(qiáng)烈而持久的免疫應(yīng)答,使受免疫動(dòng)物產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫保護(hù)力而不受刺激。  
國(guó)際公布  
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